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杓兰果胶杆菌海藻糖酶的克隆表达及应用
文献摘要：
海藻糖酶在工业发酵和食品医药等领域应用广泛,我国缺乏性能优良工业品种的海藻糖酶,同时在应用研究领域还不够深入.本研究从自然界筛选获得一株产酸性海藻糖酶的杓兰果胶杆菌(Pectobacterium cypripedii),克隆获得其海藻糖酶基因PCTre,在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)体系中实现了重组表达,在5L发酵罐上28h产酶达到4 130U/mL.酶学性质研究显示,PCTre能特异性水解海藻糖,最适反应温度和pH分别是35℃和5.5,在pH 4.0、4.5、5.0处理8 h后残余酶活仍超过80％,表现出良好的耐酸性.同时该酶还显示出优良的有机溶剂耐受性,在20％(V/V)乙醇溶液中处理24 h仍能保留60％的酶活.进一步在含有20％(V/V)乙醇和7.5％海藻糖的模拟发酵体系中,当添加500 U/L PCTre,可在16 h内完全水解海藻糖,具有良好的应用于工业乙醇发酵的潜力.
文献关键词：
海藻糖酶;海藻糖;杓兰果胶杆菌;乙醇耐受性
中图分类号：
作者姓名：
高涵;龚劲松;汪子凯;苏畅;许正宏;史劲松
作者机构：
江南大学生物工程学院糖化学与生物技术教育部重点实验室,江苏无锡214122;江南大学生命科学与健康工程学院,江苏无锡214122;江南大学生物工程学院粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心,江苏无锡214122
文献出处：
引用格式：
[1]高涵;龚劲松;汪子凯;苏畅;许正宏;史劲松-.杓兰果胶杆菌海藻糖酶的克隆表达及应用)[J].生物工程学报,2022(12):4658-4668
A类：
杓兰果胶杆菌,cypripedii,PCTre,130U
B类：
克隆表达,缺乏性,性能优良,工业品,一株,株产,产酸,Pectobacterium,海藻糖酶基因,大肠杆菌,Escherichia,coli,BL21,DE3,重组表达,5L,发酵罐,28h,产酶,酶学性质,反应温度,耐酸性,有机溶剂耐受,乙醇溶液,醇和,模拟发酵,乙醇发酵,乙醇耐受性
AB值：
0.282667
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