目的:探讨微RNA(miR)-124-3p及其靶向基因芳香烃受体(AHR)在胃癌诊断和预后评估中的价值，及其调控胃癌细胞增殖和侵袭的相关分子机制。方法:基于癌症基因组图谱数据库和基因型组织表达数据库获得miR-124-3p在胃腺癌患者的临床和预后特征，通过生物信息学分析miR-124-3p水平高低与不同病理分期、TNM分期、总生存期、无病生存期和无进展间期胃腺癌患者的关系。由Target Scan 7.1网络工具预测miR-124-3p与互作分子 AHR mRNA的作用位点，通过小鼠皮下成瘤实验、免疫组织化学染色、双荧光素酶检测、实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹实验验证miR-124-3p在 AHR mRNA中的靶结合位点。选择9只4~6周龄、体重为(18.43±0.29) g的雄性Balb/c裸小鼠，分别由小鼠尾静脉注射miR-124-3p模拟物(miR-124-3p组)、阴性对照模拟物(阴性对照组)和0.9%氯化钠溶液(氯化钠对照组)，用miR-124-3p模拟物、阴性对照模拟物和0.9%氯化钠溶液转染胃癌细胞(MKN-45、AGS)，分析生物学实验中3组小鼠 AHR和连环蛋白β1基因( CTNNB1)的mRNA表达水平，AHR和β-联蛋白的蛋白质表达水平，以及miR-124-3p对转染的胃癌细胞增殖和侵袭的影响。统计学方法采用Pearson相关分析和Holm-Sidak法校正的多重 t检验。 结果:miR-124-3p低表达与胃腺癌患者严重的病理分期、TNM分期均呈正相关( R2＝0.83、0.86， P＝0.031、0.023)；miR-124-3p高表达与总生存期、无病生存期和无进展间期延长均呈正相关( R2＝1.00、0.99、0.99， P＝0.029、0.044、0.049)。小鼠皮下成瘤实验结果显示，miR-124-3p组瘤体内的凋亡细胞数多于阴性对照组和氯化钠对照组[(43.33±1.86)/高倍视野比(20.00±1.73)/高倍视野、(18.67±1.76)/高倍视野]，差异均有统计学意义( t＝8.55、8.33， P＝0.013、0.014)。免疫组织化学染色结果显示，miR-124-3p组小鼠体内肿瘤组织的AHR蛋白质的光密度低于阴性对照组和氯化钠对照组(0.081±0.008比0.276±0.019、0.273±0.018)，差异均有统计学意义( t＝ 9.06、7.51， P＝0.012、0.017)。双荧光素酶检测结果显示，转染miR-124-3p模拟物的野生型 AHR MKN-45细胞中荧光强度低于转染阴性对照模拟物的细胞(0.293±0.020比1.000±0.032)，差异有统计学意义( t＝18.56， P<0.001)。RT-qPCR检测结果显示，转染miR-124-3p模拟物的MKN-45细胞中 AHR和 CTNNB1的mRNA水平均低于未处理的MKN-45细胞(0.51±0.09比1.02±0.02、0.46±0.03比1.03±0.01)，差异均有统计学意义( t＝4.51、16.60， P＝0.046、0.004)。蛋白质印迹实验结果显示，转染miR-124-3p模拟物的MKN-45细胞中的AHR和β-联蛋白的蛋白质相对表达量均低于转染0.9%氯化钠溶液和阴性对照模拟物的细胞(3 332.94±81.25比9 041.60±439.79、8 276.54±562.52，2 725.79±167.57比9 701.94±410.02、8 081.66±275.84)，差异均有统计学意义( t＝15.49、7.91、17.35、19.42， P＝0.004、0.016、0.003、0.003)。 结论:miR-124-3p与胃癌诊断和预后相关，可通过负向调节 AHR mRNA和蛋白质表达，进而下调 CTNNB1 mRNA和β-联蛋白通路相关蛋白质表达，于体内外诱导胃癌细胞凋亡。因此，miR-124-3p可能成为胃癌诊断和预后评估的潜在标志物。

微RNA-124-3p;胃肿瘤;受体，芳基烃;生物标记;细胞凋亡

王斯炜;张吉翔;董卫国

武汉大学人民医院消化内科，武汉　430061

中华消化杂志

[1]王斯炜;张吉翔;董卫国-.微RNA-124-3p通过芳香烃受体激活β-联蛋白通路调控胃癌细胞增殖和侵袭的机制)[J].中华消化杂志,2022(09):619-626

Sidak

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