典型文献
miR-1180基因沉默介导Wnt通路增强人结肠癌耐药细胞株THC8307/L-OHP化疗的敏感性
文献摘要：
目的 探讨微小核糖核酸-1180(miR-1180)基因沉默介导Wnt通路增强人结肠癌耐药细胞株THC8307/奥沙利铂(L-OHP)化疗敏感性的作用.方法 设计并构建miR-1180 inhibitor、NC inhibitor慢病毒载体,采用脂质体转染法将其转染至人结肠癌耐药细胞株THC8307/L-OHP内,分别记为沉默组和对照组,另取未转染细胞记为空白组,每组6个复孔.转染48 h后,荧光显微镜下观察计算沉默组和对照组细胞转染效率.分别在细胞培养液中加入0、3.13、6.25、12.5、25、50μmol/mL的L-OHP作用48 h,噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞活力和对L-OHP的半数抑制浓度(IC50);流式细胞术检测各组细胞凋亡率;实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测各组细胞miR-1180表达及Wnt、β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、多药耐药基因1(MDR1)、抗凋亡因子(Bcl-2)信使核糖核酸(mRNA)表达;蛋白质免疫印迹法(WB)检测各组细胞Wnt、β-catenin、CyclinD1、MDR1、Bcl-2蛋白表达;双荧光素酶活性实验验证miR-1180靶向调控Wnt.结果 对照组和沉默组转染效率分别为(93.51±1.89)％、(94.09±2.26)％.与空白组和对照组比,沉默组细胞活力、IC50值降低,细胞凋亡率升高,差异均有统计学意义(P<0.05),且空白组和对照组细胞活力、IC50值、细胞凋亡率差异均无统计学意义(P>0.05);与空白组和对照组比,沉默组miR-1180表达、Wnt、β-catenin、CyclinD1、MDR1、Bcl-2mRNA及蛋白表达均降低,差异均有统计学意义(P<0.05),且空白组和对照组miR-1180表达、Wnt、β-catenin、CyclinD1、MDR1、Bcl-2mRNA及蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 miR-1180基因沉默可显著降低人结肠癌耐药细胞株THC8307/L-OHP的细胞活力,提高化疗敏感性,推测是通过靶向Wnt信号通路,抑制Wnt、β-catenin、CyclinD1、MDR1、Bcl-2的表达实现此作用的.
文献关键词：
微小核糖核酸-1180;结肠癌;奥沙利铂;化疗敏感性
中图分类号：
作者姓名：
苍宏宇;郝灵芳;梁润
作者机构：
010010 内蒙古自治区人民医院肿瘤内科;010030 呼和浩特市第一医院肿瘤内科
文献出处：
引用格式：
[1]苍宏宇;郝灵芳;梁润-.miR-1180基因沉默介导Wnt通路增强人结肠癌耐药细胞株THC8307/L-OHP化疗的敏感性)[J].现代消化及介入诊疗,2022(04):463-468
A类：
THC8307
B类：
miR,基因沉默,Wnt,人结肠癌,耐药细胞株,OHP,微小核糖核酸,奥沙利铂,化疗敏感性,inhibitor,NC,慢病毒载体,脂质体转染,别记,记为,荧光显微镜,显微镜下,细胞转染,转染效率,细胞培养,培养液,噻唑蓝,MTT,细胞活力,半数抑制浓度,IC50,流式细胞术,细胞凋亡率,实时定量聚合酶链反应,qPCR,连环蛋白,catenin,细胞周期蛋白,CyclinD1,多药耐药基因,MDR1,抗凋亡,凋亡因子,Bcl,信使核糖核酸,蛋白质免疫印迹,免疫印迹法,WB,双荧光素酶,荧光素酶活性,靶向调控,2mRNA,表达差异
AB值：
0.210305
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