目的 探讨微小核糖核酸-325-3p(miR-325-3p)靶向紧密连接蛋白1(CLDN1)调控人肝癌细胞增殖、侵袭与迁移的作用.方法 将对数生长期的人肝癌细胞株SMMC-7721分为四组:阴性对照组、上调组、下调组和正常组.荧光显微镜观察各组细胞转染效率;细胞计数试剂-8(CCK-8)法检测各组细胞增殖活性;侵袭小室(Transwell)实验检测各组细胞侵袭和迁移活性;实时-定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测各组细胞miR-325-3p、CLDN1、细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)信使核糖核酸(mRNA)表达;免疫印迹法(WB)检测各组CLDN1、ERK1/2、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、MMP-2蛋白表达及p-ERK1/2水平;双荧光素酶报告基因检测验证miR-325-3p对CLDN1的作用.结果 阴性对照组、上调组和下调组细胞转染效率分别为(91.38±16.21)％、(92.17±15.93)％、(94.12±17.05)％;与正常组、阴性对照组和上调组比,下调组细胞吸光度值上升,增殖抑制率显著下降,侵袭细胞数和迁移细胞数增加,miR-325-3p表达和E-cadherin mRNA和蛋白表达显著下降,CLDN1、N-cadherin、Vimentin、MMP-2 mRNA和蛋白表达上升,ERK1/2 mRNA表达上升,p-ERK1/2水平、p-ERK1/2/ERK1/2水平上升,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);双荧光素酶报告基因实验证实miR-325-3p可靶向调控CLDN1的表达.结论 miR-325-3p可抑制肝癌细胞增殖、侵袭和迁移,可能与靶向CLDN1,抑制ERK1/2表达,促进E-cadherin表达,抑制N-cadherin、Vimentin、MMP-2表达相关.

微小核糖核酸-325-3p;紧密连接蛋白1;肝癌;增殖;侵袭;迁移

施喆;韩艳珍;周丽媛;王艳春;单铁强;单铁英;聂晓进;刘记平;朱艳梅;袁红伟

056002 河北工程大学附属医院;056002 邯郸市曲周县医院;066000 河北省秦皇岛市海港医院;056002 河北工程大学;056002 邯郸市中心医院;056002 邯郸科技职业学院;056002 邯郸市第一医院;056003 邯郸市第二医院

现代消化及介入诊疗

[1]施喆;韩艳珍;周丽媛;王艳春;单铁强;单铁英;聂晓进;刘记平;朱艳梅;袁红伟-.miR-325-3p靶向CLDN1调控人肝癌细胞增殖、侵袭与迁移)[J].现代消化及介入诊疗,2022(07):852-858

miR,3p,CLDN1,人肝癌细胞,侵袭与迁移,微小核糖核酸,紧密连接蛋白,对数生长期,肝癌细胞株,SMMC,四组,荧光显微镜观察,细胞转染,转染效率,CCK,细胞增殖活性,小室,Transwell,实验检测,细胞侵袭和迁移,迁移活性,定量聚合酶链反应,qPCR,细胞外调节蛋白激酶,ERK1,钙黏蛋白,cadherin,波形蛋白,Vimentin,基质金属蛋白酶,MMP,信使核糖核酸,免疫印迹法,WB,基因检测,测验,吸光度值,增殖抑制,抑制率,双荧光素酶报告基因实验,靶向调控,可抑制

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