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金黄色葡萄球菌α-毒素溶血活性测定方法优化及初步应用
文献摘要：
目的:优化金黄色葡萄球菌α-毒素(α-toxin，AT)溶血活性测定方法，用于无毒突变AT(non-toxic mutant AT，mAT)特异性血清抗体体外功能性评价和中和抗体滴度测定。方法:使用AT裂解兔红细胞，释放血红蛋白，通过分光光度法检测溶血活性，并对该方法中的孵育时间、兔红细胞终浓度、Triton X-100浓度进行优化，同时验证方法重复性。对mAT特异性血清抗体进行体外功能性评价，绘制AT溶血曲线，计算AT溶血率50%时的浓度，检测血清半数中和抗体滴度。结果:AT溶血活性最适检测条件为：孵育时间90 min，兔红细胞终浓度为2%(
V/V)，Triton X-100浓度为0.25%。此条件下，分别加入mAT和含mAT的多价抗原血清抗体，对AT溶血活性均起到明显的抑制作用。AT溶血率50%时浓度为1.75 μg/ml，变异系数3.75%。mAT和含mAT的多价抗原血清抗体的半数中和抗体滴度初步结果均为1∶64。
结论:优化的AT溶血活性检测方法重复性良好，且检测时间较短，可用于特异性血清抗体体外功能性评价和中和抗体滴度测定。
文献关键词：
金黄色葡萄球菌;α-毒素;溶血活性;抗体，中和
中图分类号：
作者姓名：
林海涛;郭京蓉;周继唯;袁玉兰
作者机构：
国药中生生物技术研究院有限公司金葡课题组，北京 101111
文献出处：
引用格式：
[1]林海涛;郭京蓉;周继唯;袁玉兰-.金黄色葡萄球菌α-毒素溶血活性测定方法优化及初步应用)[J].国际生物制品学杂志,2022(01):41-46
A类：
mAT
B类：
金黄色葡萄球菌,溶血活性,活性测定,测定方法,方法优化,初步应用,toxin,无毒,toxic,mutant,特异性血清,血清抗体,外功,功能性评价,中和抗体,抗体滴度,放血,分光光度法,孵育时间,Triton,验证方法,溶血率,半数,检测条件,此条,别加,多价,ml,活性检测,检测时间
AB值：
0.210586
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