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原核表达新型冠状病毒受体结合蛋白的制备及免疫原性研究
文献摘要：
目的:探索原核表达新型冠状病毒受体结合蛋白（RBD）的制备方法，并对其在小鼠体内的免疫原性进行评价。方法:用大肠埃希菌表达重组新型冠状病毒RBD，进行纯化、透析复性，比较了RBD复性前后的结构表征和抗原活性变化，最后将制备所得重组RBD免疫Babl/c小鼠，检测免疫小鼠体内的体液免疫和细胞免疫变化情况。结果:完成了大肠埃希菌表达的新型冠状病毒重组RBD的制备。复性前后，RBD的自发荧光波长发生蓝移现象，从（363.33±0.47）nm蓝移至（333.00±0.82）nm，蛋白形状从无序状态折叠为（9.55±0.39）nm的颗粒，复性后RBD与ACE-2的结合活性是复性前的128倍。活病毒中和抗体检测结果显示：血清对原型株的滴度几何平均数为136.70，对贝塔株为101.59，两者无统计学差异(
t=0.41，
P=0.700)。试验组小鼠脾淋巴细胞产生的分泌特异性IFN-γ的效应T细胞为(308.50±144.11)个斑点形成细胞/5×10
5个细胞，低于对照组[(3.75±3.11)个斑点形成细胞/5×10
5个细胞]，差异有统计学差异(
t=4.72，
P=0.010)。
结论:成功制备原核表达的新型冠状病毒重组RBD，通过体外复性折叠，能够产生良好、全面的免疫原性。
文献关键词：
新型冠状病毒;受体结合蛋白;原核表达;免疫原性;复性折叠;免疫应答
中图分类号：
作者姓名：
沈钱通;安彤;李思奇;张柯欣;杨宏宏;朱赟;陈刚;庄昉成;高孟
作者机构：
杭州医学院基础医学与法医学院，杭州 310053
文献出处：
引用格式：
[1]沈钱通;安彤;李思奇;张柯欣;杨宏宏;朱赟;陈刚;庄昉成;高孟-.原核表达新型冠状病毒受体结合蛋白的制备及免疫原性研究)[J].国际流行病学传染病学杂志,2022(01):6-11
A类：
病毒受体结合蛋白,Babl,复性折叠
B类：
原核表达,免疫原性,RBD,制备方法,大肠埃希菌,结构表征,抗原活性,活性变化,体液免疫,细胞免疫,病毒重组,自发荧光,光波长,蓝移,移至,折叠为,ACE,结合活性,活病毒,中和抗体,抗体检测,滴度,几何平均,平均数,贝塔,统计学差异,小鼠脾淋巴细胞,IFN,斑点,10
,免疫应答
AB值：
0.238668
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