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低温胁迫下山葡萄叶片酵母cDNA文库构建
文献摘要：
[目的]葡萄栽培过程中,由低温造成的冷害或冻害严重影响葡萄的生长发育、果实品质和产量.山葡萄是葡萄抗寒育种的重要种质资源,本文通过构建低温胁迫下山葡萄叶片酵母cDNA文库,为葡萄抗寒分子机理研究提供物质基础.[方法]以抗寒山葡萄左山-1(V.amuerensiscv.Zuoshan-1)扦插盆栽苗为材料,提取4℃低温处理0、2、4、8、12、24 h后叶片总RNA,采用SMART技术反转录为cDNA,经纯化和短片段去除后克隆至pGADT7三框质粒载体上,经过纯化后获得初级cDNA文库,对初级文库进行扩增、提取文库质粒后转入酵母Y187菌株中,制作扩增的酵母文库,并对文库质量进行鉴定.[结果]经检测所构建的3个读码框初级文库库容分别为1.7×106、2.0×106和1.9×106 cfu,重组率为100％,插入的片段长度主要分布在500～2000 bp;电泳检测和测序结果表明,插入片段所对应的编码蛋白类型丰富,具有良好的多态性.最终获得的Y187酵母文库滴度为4.0×108 cfu·mL?1.[结论]构建的低温胁迫下山葡萄叶片酵母cDNA文库质量较高,为筛选山葡萄低温胁迫下的互作蛋白提供了材料基础.
文献关键词：
山葡萄;酵母cDNA文库;低温;非生物胁迫
中图分类号：
作者姓名：
马登辉;马红义;李承男;虎志瑞;丁小雨;梁敏;尹晓
作者机构：
宁夏大学农学院,宁夏 银川 750021
文献出处：
引用格式：
[1]马登辉;马红义;李承男;虎志瑞;丁小雨;梁敏;尹晓-.低温胁迫下山葡萄叶片酵母cDNA文库构建)[J].福建农业学报,2022(09):1176-1181
A类：
amuerensiscv,Zuoshan
B类：
低温胁迫,下山,山葡萄,葡萄叶片,酵母,cDNA,文库构建,冷害,冻害,果实品质和产量,抗寒,育种,种质资源,分子机理,扦插,盆栽,栽苗,低温处理,后叶,SMART,短片,pGADT7,质粒,转入,Y187,母文,经检测,读码,库容,cfu,段长度,bp,电泳,编码蛋白,多态性,滴度,互作蛋白,非生物胁迫
AB值：
0.317345
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