典型文献
小麦转录因子TaWRKY28基因克隆与抗旱性分析
文献摘要：
[目的]克隆小麦TaWRKY28基因,通过农杆菌浸染法将其转化至拟南芥,研究转基因拟南芥植株生理生化指标变化,探究其在抵御非生物胁迫中的作用.[方法]采用RT-PCR方法,从小麦百农207 cDNA中克隆得到TaWRKY28基因,利用ProtParam等软件对其氨基酸序列进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR方法,分析TTaWRKY28基因的组织表达特异性及在NaCl、ABA、H2O2、干旱和低温逆境胁迫下的表达情况;构建基因超表达载体,通过花序浸染法转化拟南芥,选取TaWRKY28基因相对表达量较高的转基因T3拟南芥株系,测定拟南芥超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)的活性以及丙二醛(MDA)、H2O2和脯氨酸含量,研究TaWRKY28对拟南芥抗旱性的影响.[结果]成功克隆获得小麦TaWRKY28基因,该基因ORF全长为978 bp,编码325个氨基酸,相对分子质量为34.87 ku,理论等电点为9.27,含有1个WRKY保守结构域和1个C2H2锌指结构域,属于WRKY基因家族的第II类成员.序列系统进化分析结果显示,小麦TaWRKY28与大麦HvWRKY2亲缘关系最近.亚细胞定位显示该基因位于细胞核中.qRT-PCR结果表明,TaWRKY28在小麦根、茎、叶、雌蕊和雄蕊组织中均有表达,但具有组织特异表达性,在叶中表达量最高,雄蕊中次之,雌蕊中表达量最低,且受NaCl、ABA、H2O2、干旱和低温胁迫后TTaWRKY28表达会增强.对TaWRKY28转基因拟南芥植株的抗旱性分析表明,在干旱条件下,转基因植株的表型优于野生型,SOD、POD活性和脯氨酸含量显著增加,而H2O2和MDA含量显著降低,转基因植株抗旱性显著提高.[结论]克隆了小麦TaWRKY28基因,该基因可以增强转基因拟南芥植株的抗旱能力.
文献关键词：
小麦;转录因子;TaWRKY28基因;抗旱性
中图分类号：
作者姓名：
于永昂;睢晓湉;张蕾;张夏冰
作者机构：
河南科技学院生命科技学院现代生物育种河南省协同创新中心,河南新乡453003
文献出处：
引用格式：
[1]于永昂;睢晓湉;张蕾;张夏冰-.小麦转录因子TaWRKY28基因克隆与抗旱性分析)[J].西北农林科技大学学报（自然科学版）,2022(04):32-41
A类：
TaWRKY28,TTaWRKY28,HvWRKY2
B类：
小麦,基因克隆,抗旱性,农杆菌,浸染法,转基因拟南芥,生理生化指标,指标变化,非生物胁迫,cDNA,ProtParam,氨基酸序列,生物信息学分析,组织表达,达特,NaCl,ABA,H2O2,逆境胁迫,超表达载体,花序,基因相对表达量,株系,POD,脯氨酸含量,ORF,全长,bp,相对分子质量,ku,等电点,保守结构域,C2H2,锌指,基因家族,II,系统进化分析,大麦,亲缘关系,亚细胞定位,细胞核,qRT,麦根,雌蕊,雄蕊,有组织,特异表达,低温胁迫,转基因植株,野生型,抗旱能力
AB值：
0.260377
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