典型文献
桃Pp4CL2基因的克隆及抗寒功能验证
文献摘要:
基于'丁家坝李光桃'抗寒转录组数据,采用RT-PCR技术克隆桃4-香豆酸辅酶A连接酶基因(Pp4CL2),并对其进行生物信息学及转化模式植物拟南芥和烟草的抗寒分析,以解析'丁家坝李光桃'的抗寒机制.结果显示:(1)成功克隆获得桃Pp4CL2基因(登录号:LOC18792923),其cDNA序列为1635 bp,编码544个氨基酸残基,具有4CL基因家族保守结构域.(2)二级结构分析显示,Pp4CL2蛋白由4种状态的二级结构组成,其中α螺旋占30.51%、β-折叠占7.35%、不规则卷曲及延伸链分别占41.54%和20.59%.(3)顺式作用元件分析发现,Pp4CL2基因上游启动子区含有光、低温以及多种激素响应元件.(4)序列系统进化分析显示,桃Pp4CL2与杏(Prunus armeniaca)、欧洲甜樱桃(Prunus avium)和梅(Prunus mume)的蛋白相似性最高,分别为99.08%、97.98%和96.14%.(5)成功构建转化载体Pp4CL2-pRI101,对拟南芥和烟草进行遗传转化并通过PCR鉴定获得转基因拟南芥和烟草.(6)与野生型相比,低温胁迫下转基因拟南芥和烟草的Pp4CL2基因相对表达量高,受冷害程度轻,具有更高的渗透调节物质含量和抗氧化酶活性,对低温具有更强的耐受性.研究表明,过表达Pp4CL2基因可增强植物对低温的耐受性,推测Pp4CL2基因在'丁家坝李光桃'响应低温胁迫过程中具有重要作用.
文献关键词:
桃;4-香豆酸辅酶A连接酶;基因克隆;低温;功能验证
中图分类号:
作者姓名:
李小兰;郝兰兰;张帆;王鸿
作者机构:
甘肃省农业科学院林果花卉研究所, 兰州 730070;甘肃农业大学园艺学院,兰州 730070
文献出处:
引用格式:
[1]李小兰;郝兰兰;张帆;王鸿-.桃Pp4CL2基因的克隆及抗寒功能验证)[J].西北植物学报,2022(12):1981-1990
A类:
Pp4CL2,LOC18792923,pRI101
B类:
功能验证,转录组数据,香豆酸,辅酶,连接酶,酶基因,转化模式,烟草,抗寒机制,登录号,cDNA,bp,氨基酸残基,基因家族,保守结构域,二级结构,结构组成,折叠,卷曲,顺式作用元件,启动子区,激素响应,响应元,系统进化分析,Prunus,armeniaca,欧洲甜樱桃,avium,mume,白相,遗传转化,转基因拟南芥,野生型,低温胁迫,基因相对表达量,受冷,冷害,渗透调节物质含量,抗氧化酶活性,耐受性,过表达,基因克隆
AB值:
0.319376
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