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柯萨奇B组3型病毒SYBR GreenⅠRT-PCR检测方法的建立
文献摘要：
目的 建立一种灵敏、特异的柯萨奇B组3型(CV-B3)病原SYBR GreenⅠRT-PCR实时荧光定量检测方法,用于快速、准确地检测CV-B3.方法 设计柯萨奇B组病毒通用引物以及VP1基因的T7启动子特异性引物,以体外转录获得的RNA为标准品,绘制标准曲线,建立CV-B3的荧光定量PCR检测方法;对检测方法的敏感度、特异性、重复性进行评价.结果 该检测方法在10～109拷贝/微升范围内具有良好的扩增效率和线性关系,最低检测限为10拷贝/微升,标准曲线r2=0.999,扩增效率为95.7％;且对柯萨奇病毒A组6型(CV-A6)、柯萨奇病毒A组10型(CV-A10)、肠道病毒71型(EV-71)均无交叉反应,重复性实验变异系数(CV％)<2％.结论 本实验建立的检测方法敏感度较高,同时具备良好的特异性及重复性,可用于CV-B3病原的临床及实验室样本的定性定量检测.
文献关键词：
柯萨奇病毒B组3型;SYBR GreenⅠRT-PCR
中图分类号：
作者姓名：
张伟;李咏洁;杨凤梅;李艳艳;靳玮华;徐鸿界;李明学;刘权;赵远;和占龙
作者机构：
650118 昆明,中国医学科学院医学生物学研究所
文献出处：
引用格式：
[1]张伟;李咏洁;杨凤梅;李艳艳;靳玮华;徐鸿界;李明学;刘权;赵远;和占龙-.柯萨奇B组3型病毒SYBR GreenⅠRT-PCR检测方法的建立)[J].医学研究杂志,2022(01):55-59
A类：
B类：
SYBR,Green,CV,B3,荧光定量检测,通用引物,VP1,T7,启动子,特异性引物,体外转录,标准品,标准曲线,拷贝,微升,检测限,r2,柯萨奇病毒,A6,A10,肠道病毒,EV,交叉反应,定性定量检测
AB值：
0.340166
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