目的:建立一种双通道TaqMan实时荧光PCR方法,应用于别嘌呤醇不良反应相关基因HLA-B*58:01的快速基因检测,并验证该方法的灵敏度、特异性、重复性及可靠性等性能指标.方法:针对HLA-B*58:01等位基因序列设计引物和Taqman探针,建立一种双通道TaqMan实时荧光PCR检测方法,收集陕西省人民医院、浙江大学医学院附属第二医院、浙江大学医学院附属邵逸夫医院三家医院收治的1158例临床诊断为痛风或血清尿酸高患者的外周血标本,采用双盲对照实验,分别采用双通道TaqMan实时荧光PCR法与已获审批的商业试剂盒共同检测所有标本,对比两种方法的检测结果进而评价该TaqMan实时荧光PCR方法的临床性能.结果:双通道TaqMan实时荧光PCR法特异性高,稳定可靠,可检测低至1 ng/μL的阳性样本;采用双通道Taq-Man 实时荧光PCR法与已获审批的商业试剂盒在1158份患者标本中检出的HLA-B*58:01阳性及阴性标本均相同,阳性标本147例,阴性标本1011例,该组患者HLA-B*58:01基因携带率为12.69％,两种方法符合率为100％(1158/1158),两组实验结果数据采用SPSS分析P=1.000,差异无统计学意义.所有受检者HLA-B* 58:01携带率为12.69％(147/1158).结论:双通道TaqMan实时荧光PCR可以作为一种快速、特异、灵敏的HLA-B*58:01的基因检测方法,用于别嘌呤醇用药前的相关不良反应风险评估.

别嘌呤醇;HLA-B*58:01;基因检测;Taqman探针;实时荧光PCR

宫艳艳;马娟;刘英;陶志华;张钧;崔康

陕西省人民医院检验科 陕西西安710068;浙江大学医学院附属第二医院检验科 浙江杭州310009;浙江大学医学院附属邵逸夫医院检验科 浙江杭州310020;睢宁县中医院药剂科 江苏睢宁221200

现代生物医学进展

[1]宫艳艳;马娟;刘英;陶志华;张钧;崔康-.双通道TaqMan实时荧光PCR应用于别嘌呤醇不良反应相关基因HLA-B*58:01的检测与验证)[J].现代生物医学进展,2022(21):4163-4167

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