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逆转录重组酶介导的新型冠状病毒可视化快速检测方法的建立
文献摘要：
目的 新型冠状病毒肺炎(COVID-19)传播迅速,对经济造成威胁.研究快速检测方法,为其检测建立新的方法储备. 方法 根据严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核衣壳蛋白(N)基因、刺突蛋白(S)基因及开放阅读区(ORF1ab)基因保守区序列结合逆转录重组酶介导的等温扩增(RT-RAA)和荧光定量、胶体金侧向流免疫层析试纸条(LFD)建立逆转录重组酶介导的等温扩增荧光法(荧光RT-RAA法)和试纸条法(RT-RAA-LFD法)并进行优化,分别以构建的N、S、ORF1ab基因质粒为模板评估这两种方法的灵敏性和重复性;对其他冠状病毒质粒[如HCoV-229E、HCoV-OC43、HCoV-NL63、HCoV-HKU1、中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)、SARS]模板进行检测,验证这两种方法的特异性. 结果 两种检测方法均可在39℃恒温条件下12 min内完成检测.荧光RT-RAA法中,ORF1ab基因可检测至100拷贝数,N、S基因可检测至101拷贝数.RT-RAA-LFD法中,3种基因均可检测至103拷贝数.两种方法与其他类型的冠状病毒无交叉反应,具有良好的特异性. 结论 RT-RAA法和LFD法检测时间短并具有较好的特异性、灵敏性和重复性,可用于SARS-CoV-2的快速筛查、诊断和监测.
文献关键词：
新型冠状病毒肺炎;新型冠状病毒;重组酶介导的等温扩增;快速检测
中图分类号：
作者姓名：
蔡欣;周婷婷;朱进;孙学伟;刘晓光;杨展;汪茂荣
作者机构：
210002 南京,东部战区总医院秦淮医疗区肝病科教研室/安徽医科大学八一临床学院;210001 南京,东部战区疾病预防控制中心;264003 烟台,滨州医学院基础医学院;210002 南京,南方医科大学南京临床医学院(东部战区总医院)呼吸与危重症医学科
文献出处：
引用格式：
[1]蔡欣;周婷婷;朱进;孙学伟;刘晓光;杨展;汪茂荣-.逆转录重组酶介导的新型冠状病毒可视化快速检测方法的建立)[J].医学研究与战创伤救治,2022(05):471-477
A类：
B类：
逆转录,快速检测方法,严重急性呼吸综合征冠状病毒,SARS,核衣壳蛋白,刺突蛋白,ORF1ab,重组酶介导的等温扩增,RAA,胶体金,侧向流,免疫层析试纸条,LFD,荧光法,质粒,灵敏性,病毒质,HCoV,229E,OC43,NL63,HKU1,中东呼吸综合征,MERS,恒温,拷贝数,交叉反应,检测时间,快速筛查
AB值：
0.244709
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