典型文献
Bdnf基因过表达慢病毒载体的构建及表达
文献摘要：
目的:探讨脑源性神经营养因子(BDNF)基因过表达慢病毒载体的构建和包装,检测其在大鼠海马原代神经元中的表达.方法:利用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增Bdnf基因的exons4和CDS序列,将其克隆到pcDNA3.1-mCherry载体上,构建pcDNA3.1-exons4-Bdnf-mCherry慢病毒表达载体.重组质粒经KpnI和EcoRI双酶切鉴定和测序验证.使用三质粒包装系统将重组质粒pcDNA3.1-exons4-Bdnf-mCherry和慢病毒辅助包装质粒pMDLg/pRRE、pRSV-Rev和pCMV-VSV-G共转染293T细胞,制备并浓缩慢病毒颗粒,感染大鼠原代海马神经元,荧光显微镜和实时荧光定量PCR检测目的基因在原代海马神经元中的表达.结果:成功构建pcDNA3.1-exons4-Bdbf-mCherry慢病毒过表达载体,转染后的293T细胞表达红色荧光,并在培养大鼠海马原代神经元中表达增加(P<0.05).结论:成功构建含有特定转录本的Bdnf基因过表达慢病毒载体,为进一步深入研究Bdnf的作用提供技术基础.
文献关键词：
脑源性神经营养因子;慢病毒;293T细胞;原代海马神经元;基因表达;细胞培养
中图分类号：
作者姓名：
钟锦;史晋朝;张倩;孟金凤;张倩倩;李建国
作者机构：
山西医科大学生理学系,细胞生理学教育部重点实验室,太原030001
文献出处：
引用格式：
[1]钟锦;史晋朝;张倩;孟金凤;张倩倩;李建国-.Bdnf基因过表达慢病毒载体的构建及表达)[J].中国应用生理学杂志,2022(05):397-400
A类：
exons4,KpnI,pMDLg,pRRE,pRSV,Bdbf
B类：
Bdnf,基因过表达,慢病毒载体,脑源性神经营养因子,BDNF,马原,原代神经元,聚合酶链式反应,CDS,pcDNA3,mCherry,慢病毒表达载体,重组质粒,粒经,EcoRI,双酶,包装系统,Rev,pCMV,VSV,共转染,293T,慢病毒颗粒,原代海马神经元,荧光显微镜,检测目的,目的基因,过表达载体,红色荧光,养大,转录本,技术基础,细胞培养
AB值：
0.239233
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