目的 探讨hsa-Let?7a?5p对局限性硬皮病成纤维细胞(LSFs)纤维化过程的影响及其与转化生长因子?β受体(TGF?βR)和TGF?β/Smad信号通路的关系.方法 将携带hsa?Let?7a?5p和shTGF?βR1的慢病毒载体及空白慢病毒载体感染LSFs.CCK?8法和划痕实验检测各组LSFs的增殖和迁移情况.RT?qPCR、免疫荧光和Western blot检测转染的效率以及各组LSFs的Ⅰ、Ⅲ型胶原、α?SMA、TGF?βR1、TGF?β、p?Smad2/3的mRNA和蛋白表达水平.结果 病毒感染LSFs后,shTGF?βR1组的TGF?βR1表达量明显低于对照组(P<0.05);shTGF?βR1组的细胞增殖率、迁移能力均有所降低;shTGF?βR1组的Ⅰ、Ⅲ型胶原、α?SMA、TGF?β、p?Smad2/3的mRNA和蛋白表达水平均明显低于对照组(P<0.05).生物信息学分析表明hsa?Let?7a?5p可以与TGF?βR13′?UTR的靶区位置配对,hsa?Let?7a?5p慢病毒转染组的hsa?Let?7a?5p表达量明显高于对照组(P<0.05),TGF?βR1表达量明显降低(P<0.05).hsa?Let?7a?5p组的细胞增殖率、迁移能力均有所降低;hsa?Let?7a?5p组的Ⅰ、Ⅲ型胶原、α?SMA、TGF?β、p?Smad2/3的mRNA和蛋白表达水平均明显低于对照组(P<0.05).结论 hsa?Let?7a?5p在体外通过靶向结合TGF?βR1调控TGF?β/Smad通路,抑制LSFs增殖与迁移,降低LSFs的纤维化标志物,从而抑制局限性硬皮病的纤维化.

hsa-Let-7a-5p;局限性硬皮病;纤维化

王立铨;黄久佐;俞楠泽;马旭达;李天浩;龙笑

中国医学科学院 北京协和医学院 北京协和医院 整形外科,北京100032

基础医学与临床

[1]王立铨;黄久佐;俞楠泽;马旭达;李天浩;龙笑-.hsa-Let?7a?5p靶向结合TGF?βR1抑制局限性硬皮病成纤维细胞纤维化)[J].基础医学与临床,2022(12):1841-1849

LSFs,shTGF

hsa,Let,7a,5p,局限性硬皮病,病成,成纤维细胞,细胞纤维化,对局,转化生长因子,慢病毒载体,CCK,划痕实验,实验检测,增殖和迁移,移情,qPCR,免疫荧光,blot,SMA,Smad2,蛋白表达水平,细胞增殖率,迁移能力,生物信息学分析,R13,UTR,靶区,慢病毒转染

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