典型文献
肠炎沙门氏菌SEF14菌毛的表达及其对该菌的特异性检测研究
文献摘要：
为获得肠炎沙门氏菌SEF14菌毛蛋白并检测其生物学功能,本研究以肠炎沙门氏菌标准株SE50336为模板,PCR扩增其含分泌信号肽的sef14操纵子基因片段,并克隆至表达载体pBR322中,构建重组质粒pBR322-sef14,将该重组质粒转化至经修饰且不含任何菌毛的大肠杆菌SE5000M株中,获得重组菌pBR322-sef14/SE5000M.将重组菌pBR322-sef14/SE5000M与本实验室制备的SefA(SEF14菌毛的主要亚基)单克隆抗体(MAb)凝集;利用透射电镜和免疫电镜观察上述重组菌并通过SDS-PAGE和western blot鉴定,利用该重组菌pBR322-sef14/SE5000M与肠炎沙门氏菌阳性鸡血清及其他菌的阳性鸡血清结合.结果显示,本实验室制备的SefA MAb能够特异性识别该重组菌,并产生明显的肉眼可见的凝集反应.重组菌表达的SEF14菌毛产物大小约为14.3 ku,与菌毛的主要亚基SefA的大小一致,电镜观察到重组菌表面有明显的菌毛结构.在肠炎沙门氏菌特异性靶向检测中,该重组菌表达的菌毛蛋白仅与肠炎沙门氏菌阳性鸡血清反应,能够在2min内用肉眼观察到清晰的凝集颗粒,而不与鸡白痢、鸡伤寒、鼠伤寒沙门氏菌阳性鸡血清反应.本研究首次克隆了肠炎沙门氏菌sef14操纵子基因并在体外成功表达并进行了功能鉴定,上述研究结果为进一步研究SEF14菌毛及建立特异性诊断技术提供基础.
文献关键词：
肠炎沙门氏菌;SEF14菌毛;sef14操纵子
中图分类号：
作者姓名：
侯千禧;顾宣强;刘家奇;李雅倩;夏芃芃;段强德;朱国强
作者机构：
扬州大学兽医学院江苏省重要动物传染病与人兽共患病协同创新中心,江苏 扬州 225009
文献出处：
引用格式：
[1]侯千禧;顾宣强;刘家奇;李雅倩;夏芃芃;段强德;朱国强-.肠炎沙门氏菌SEF14菌毛的表达及其对该菌的特异性检测研究)[J].中国预防兽医学报,2022(01):91-95
A类：
SEF14,SE50336,sef14,SE5000M,SefA
B类：
肠炎沙门氏菌,特异性检测,菌毛蛋白,生物学功能,标准株,信号肽,操纵子,表达载体,pBR322,重组质粒,大肠杆菌,亚基,单克隆抗体,MAb,透射电镜,免疫电镜,电镜观察,SDS,PAGE,western,blot,鸡血,清结,特异性识别,肉眼,凝集反应,ku,2min,鸡白痢,鼠伤寒沙门氏菌,功能鉴定,诊断技术
AB值：
0.192717
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