目的 探讨beclin 1调节的自噬激活分子(AMBRA1)在同型半胱氨酸(Hcy)引起肝细胞自噬中的作用.方法 体外培养肝细胞,分为对照组(0 μmol/L Hcy处理)和100 μmol/L Hcy处理组.Western blot法检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3B(LC3BⅡ、LC3BⅠ)的表达水平;使用(0、25、50、100)μmol//L氯喹(CQ)处理肝细胞,CCK-8法检测CQ对肝细胞增殖的抑制作用,Western blot法检测LC3B和AMBRA1的表达;采用AMBRA1小干扰RNA感染肝细胞后,实时荧光定量PCR和Western blot法检测肝细胞AMBRA1表达干扰效率.敲低AMBRA1后肝细胞用Hcy处理,Western blot法检测LC3B蛋白表达水平,转染表达双荧光蛋白和LC3的腺病毒(mRFP-GFP-LC3),激光共聚焦显微镜观察细胞内自噬流的变化.结果 与对照组相比较,Hcy处理组LC3BⅡ/LC3BⅠ的比值升高;50 μmol//L CQ对肝细胞增殖的抑制率接近于50％;与对照组相比,Hcy组LC3BⅡ/LC3BⅠ比值、AMBRA1的表达明显升高,而Hcy联合CQ组的LC3B Ⅱ/LC3B Ⅰ比值、AMBRA1的表达比Hcy组明显降低;敲低AMBRA1后,肝细胞LC3BⅡ/LC3BⅠ比值下降;与对照组相比,Hcy组自噬体和自噬溶酶体增加,敲低AMBRA1后,自噬体和自噬溶酶体减少.结论 Hcy可通过激活AMBRA1促进肝细胞自噬.

同型半胱氨酸(Hcy);自噬;beclin 1调节的自噬激活分子(AMBRA1)

马芳;张辉;沈江涌;马胜超;万瑀;贺茜;焦运;王强;姜怡邓

宁夏医科大学基础医学院病理生理学系,宁夏银川750004;宁夏医科大学总医院烧伤整形外科,宁夏银川750004;国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室,宁夏银川750004;宁夏医科大学临床医学院,宁夏银川750004;宁夏医科大学总医院感染科,宁夏银川750004

细胞与分子免疫学杂志

[1]马芳;张辉;沈江涌;马胜超;万瑀;贺茜;焦运;王强;姜怡邓-.同型半胱氨酸通过激活beclin 1调节的自噬激活分子(AMBRA1)促进人肝细胞自噬)[J].细胞与分子免疫学杂志,2022(09):813-818

AMBRA1

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