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典型文献
miR-101-3p靶向E2F2调控黑色素瘤细胞增殖的分子机制探讨
文献摘要:
目的 探讨miR-101-3p靶向E2F转录因子2(E2F2)调控黑色素瘤细胞增殖的作用机制.方法 使用GEPIA、OSskcm等数据库联合分析E2F2在黑色素瘤中的表达,并评估转录因子E2F2在黑色素瘤预后中的价值;利用短发夹RNA(shRNA)抑制黑色素瘤细胞MV3中E2F2表达后,分别采用PI染色和流式细胞术检测细胞周期的改变;Western blot实验检测细胞周期蛋白E(CyclinE)和细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)的表达水平;免疫荧光实验检测细胞中自噬相关蛋白LC3B的表达水平;裸鼠荷瘤实验观察黑色素瘤在体内生长的变化.经miR-101-3p mimics处理后,采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测MV3细胞中miR-101-3p的表达水平,同时利用qPCR和Western blot实验检测E2F2的表达水平;通过MTT、BrdU法检测MV3细胞增殖水平.结果 E2F2表达升高的患者预后更差(P<0.05);与shGFP组相比,shE2F2组中处于G0/G1期的细胞比例显著增多(P<0.05),CyclinE和CDK2的表达水平显著降低,自噬相关蛋白LC3B荧光信号明显减少(P<0.05),体内黑色素瘤形成质量显著降低(P<0.05);采用miR-101-3p mimics处理后,MV3细胞中miR-101-3p的表达水平明显升高(P<0.05),E2F2的mRNA和蛋白表达均显著低于NC mimics处理组(P<0.05),同时MTT结果 表明miR-101-3p mimics组MV3细胞的活力显著降低(P<0.05),BrdU标记试验结果 显示miR-101-3p mimics组细胞中BrdU阳性信号明显减少(P<0.05).结论 miR-101-3p可靶向E2F2并抑制其表达,进而降低黑色素瘤细胞增殖水平.
文献关键词:
黑色素瘤;E2F2转录因子;细胞增殖;miR-101-3p
作者姓名:
李吻吻;朱智鑫;韩利民;焦艳林;翁宗琴;赵海龙
作者机构:
遵义医科大学基础医学院病理生理学教研室 563000
文献出处:
引用格式:
[1]李吻吻;朱智鑫;韩利民;焦艳林;翁宗琴;赵海龙-.miR-101-3p靶向E2F2调控黑色素瘤细胞增殖的分子机制探讨)[J].天津医药,2022(11):1121-1127
A类:
OSskcm,MV3,shGFP,shE2F2
B类:
miR,3p,黑色素瘤细胞,机制探讨,GEPIA,联合分析,短发,发夹,shRNA,流式细胞术,blot,实验检测,CyclinE,细胞周期蛋白依赖性激酶,CDK2,免疫荧光,自噬相关蛋白,LC3B,裸鼠,荷瘤,实验观察,mimics,qPCR,MTT,BrdU,G0,G1,荧光信号,NC
AB值:
0.163863
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