目的:探讨毓麟珠对卵巢早衰(POF)大鼠自噬的影响,并分析其防治POF的作用机制.方法:雌性SD大鼠采用随机数字表法选取16只为正常组,其余大鼠通过腹腔注射环磷酰胺建立POF模型.造模成功大鼠分为POF组、戊酸雌二醇(0.09 mg/kg)组(简称雌二醇组)、低剂量(7.56 g/kg)毓麟珠组、高剂量(15.12 g/kg)毓麟珠组和毓麟珠+沉默信息调节因子1(SIRT1)抑制剂EX527组(简称毓麟珠+EX527组),每组16只.低、高剂量毓麟珠组大鼠分别灌胃相应剂量的毓麟珠药液,雌二醇组大鼠给予戊酸雌二醇溶液灌胃,毓麟珠+EX527组大鼠在给予15.12 g/kg毓麟珠药液灌胃的同时腹腔注射10 mg/kg EX527,正常组和POF组大鼠给予等体积的生理盐水干预,每天1次,连续给药3周.给药结束后,记录各组大鼠的双侧卵巢重量和体重,计算卵巢指数;ELISA检测各组大鼠血清雌二醇(E2)、促卵泡激素(FSH)和抗缪勒管激素(AMH)水平;检测各组大鼠卵巢组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)水平;苏木精-伊红(HE)染色和TUNEL染色观察各组大鼠卵巢组织病理变化,计数各级卵泡数,并分析窦卵泡中颗粒细胞凋亡水平;免疫组织化学法检测各组大鼠卵巢组织微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)蛋白表达;RT-qPCR检测各组大鼠卵巢组织LC3B、p62、beclin-1、Atg5和Atg7的mRNA表达;Western blot检测各组大鼠卵巢组织LC3A/B、p62、beclin-1、Atg5、Atg7、SIRT1、叉头框蛋白O1(FoxO1)和乙酰化FoxO1(Ac-FoxO1)的蛋白水平;评估POF大鼠的生育能力.结果:与正常组相比,POF组大鼠卵巢指数,血清E2和AMH水平,卵巢组织SOD和CAT活性,卵巢原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡和窦卵泡数量,p62 mRNA和蛋白水平,SIRT1和FoxO1蛋白水平,以及受孕率和胚胎数均显著降低,而血清FSH水平,卵巢组织MDA水平,闭锁卵泡数量,颗粒细胞凋亡水平,卵巢LC3B蛋白阳性表达,LC3B、beclin-1、Atg5和Atg7 mRNA水平,beclin-1、Atg5、Atg7和Ac-FoxO1蛋白水平,以及LC3-II/LC3-I比值均显著升高(P<0.05);与POF组相比,高剂量毓麟珠组和雌二醇组大鼠卵巢指数,血清E2和AMH水平,卵巢组织SOD和CAT活性,卵巢原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡和窦卵泡数量,p62 mRNA和蛋白水平,SIRT1和FoxO1蛋白水平,以及受孕率和胚胎数均显著升高,而血清FSH水平,卵巢组织MDA水平,闭锁卵泡数量,颗粒细胞凋亡水平,卵巢LC3B蛋白阳性表达,LC3B、beclin-1、Atg5和Atg7 mRNA水平,beclin-1、Atg5、Atg7和Ac-FoxO1蛋白水平,以及LC3-II/LC3-I比值均显著降低(P<0.05);EX527可显著减弱毓麟珠对POF大鼠卵巢功能的保护作用.结论:毓麟珠可能通过激活SIRT1-FoxO1通路抑制氧化应激及细胞自噬,从而改善POF大鼠卵巢功能.

毓麟珠;卵巢早衰;氧化应激;自噬;SIRT1-FoxO1信号通路

何啸兰;王鹍鹏;周月希;吴尚蓉;胡雅君

武汉市中西医结合医院生殖医学科,湖北武汉430030;武汉市中医医院,湖北武汉430030

中国病理生理杂志

[1]何啸兰;王鹍鹏;周月希;吴尚蓉;胡雅君-.毓麟珠对卵巢早衰大鼠SIRT1-FoxO1-自噬通路的调控作用)[J].中国病理生理杂志,2022(06):1091-1104

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