目的 探索circ_0007762和miR-18a-5p的相互作用及在肺成纤维细胞中的作用.方法 利用生物信息学分析circ_0007762在特发性肺纤维化(IPF)患者的表达并筛选其miRNA靶标,在转化生长因子(TGF)-β1干预的肺成纤维细胞HFL1中验证其表达.双荧光素酶报告基因实验验证miR-18a-5p mimics与报告基因载体共转染后的荧光素酶活性.CCK-8法检测circ_0007762、miR-18a-5p敲低及TGF-β1、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)干预后的细胞活力.Western blot检测circ_0007762、miR-18a-5p敲低及TGF-β1、3-MA干预后的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(collagenⅠ)、P62及微管相关蛋白1轻链3β(LC3B)水平.结果 HFL1细胞中,TGF-β1组较Control组circ_0007762表达水平上调,miR-18a-5p表达下调(P<0.05).在circ_0007762野生型载体中,过表达miR-18a-5p抑制了荧光素酶活性(P<0.05).circ_0007762敲低后细胞增殖活力下降,并由miR-18a-5p的抑制而恢复,同时3-MA可逆转TGF-β1诱导的成纤维细胞增殖(P<0.05).TGF-β1促进α-SMA、collagenⅠ及LC3BⅡ/Ⅰ表达,而抑制P62水平(P<0.05).相较于TGF-β1+si-NC组,TGF-β1+si-circ_0007762组P62表达上调,其余蛋白下调,并能由miR-18a-5p的抑制而逆转(P<0.05).此外,3-MA增强了P62的表达而降低了α-SMA、collagenⅠ的表达及LC3BⅡ/Ⅰ水平(P<0.05).结论 circ_0007762可与miR-18a-5p相互作用,通过激活自噬促进肺成纤维细胞增殖,诱导纤维化相关表型.

特发性肺纤维化;自噬;细胞增殖;成纤维细胞;转化生长因子β;circ_0007762;miR-18a-5p

黄彬;张军;郑金旭;丁慢玲;吴妍

江苏大学附属医院呼吸与危重症医学科 212001;江苏大学附属澳洋医院呼吸与重症医学科

天津医药

[1]黄彬;张军;郑金旭;丁慢玲;吴妍-.circ_0007762通过miR-18a-5p调节肺成纤维细胞自噬的机制研究)[J].天津医药,2022(06):571-578

1+si

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