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EV71外壳蛋白表位肽多克隆抗血清的制备及鉴定
文献摘要:
目的 制备肠道病毒71型(EV71)外壳蛋白表位肽多克隆抗血清.方法 利用5种B细胞表位预测软件对EV71外壳蛋白进行分析,设计针对病毒蛋白(VP)的4种表位肽,即VP1(aa.204-223)、VP2(aa.133-163)、VP3(aa.139-148+aa.173-191)和VP4(aa.1-23),化学合成后与钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)偶联得到相应肽.然后,分别联合MF59/CpGC274佐剂皮下免疫BALB/c小鼠6次,间隔2周,采集血清,用ELISA和Western blot对其抗体活性进行分析.结果 4种抗血清均可有效结合EV71病毒和其变性病毒,VP2抗血清与变性病毒的结合活性较高,其余3种与病毒及变性病毒的结合力相当;而且4种抗血清均可与病毒样颗粒(VLP)及变性VLP结合.VP1和VP2抗血清分别与EV71 VLP中的组成蛋白VP1和VP0(VP2和VP4前体蛋白)结合,其中VP2抗血清的结合活性最好,VP1抗血清次之;同时,VP1和VP2抗血清还可与EV71病毒特异性高效结合,且VP2抗血清可同时结合EV71病毒的空心颗粒的VP0及实心颗粒的VP2.VP3和VP4抗血清与VLP和病毒未显示明显的结合活性.结论 成功制备了4种EV71表位肽多克隆抗血清,为ELISA和Western blot提供检测工具,并可用于EV71疫苗质控(QC)研究.
文献关键词:
肠道病毒71型;疫苗;外壳蛋白;表位肽;抗血清
中图分类号:
作者姓名:
李晨;张婷;王志荣;许雪梅
作者机构:
中国医学科学院基础医学研究所 北京协和医学院基础学院 生物物理及结构生物学系,北京100005
文献出处:
引用格式:
[1]李晨;张婷;王志荣;许雪梅-.EV71外壳蛋白表位肽多克隆抗血清的制备及鉴定)[J].基础医学与临床,2022(11):1661-1666
A类:
148+aa,CpGC274,VP0
B类:
EV71,外壳蛋白,表位肽,多克隆抗血清,肠道病毒,细胞表位,表位预测,预测软件,病毒蛋白,VP1,VP2,VP3,VP4,化学合成,血蓝蛋白,KLH,偶联,MF59,佐剂,BALB,blot,有效结合,结合活性,结合力,病毒样颗粒,VLP,清分,成蛋白,高效结合,实心,检测工具,苗质,质控,QC
AB值:
0.247443
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