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HCBP6模拟磷酸化重组质粒的构建与亚细胞定位
文献摘要：
目的 构建HCBP6及HCBP6不同位点模拟磷酸化的绿色荧光蛋白重组质粒,明确其亚细胞定位.方法 以构建含有570 bp的HCBP6外显子基因的绿色荧光蛋白重组质粒为基础,应用快速定点突变技术构建HCBP6不同位点模拟磷酸化的重组质粒.将重组质粒测序并进行序列比对.利用jetPRIME转染体系将HCBP6及HCBP6不同位点模拟磷酸化的重组质粒转染至细胞中,应用Real-Time PCR技术检测目的基因mRNA的表达,应用Western blot技术检测目的基因蛋白表达,应用荧光显微镜观察HCBP6不同位点磷酸化质粒的亚细胞定位.结果 将测序的重组序列与目的基因进行比对,发现重组序列与目的基因完全一致,说明HCBP6不同位点模拟磷酸化的重组质粒构建成功.Real-Time PCR和Western blot表明,与对照组相比,实验组高表达HCBP6及HCBP6不同位点模拟磷酸化的基因.免疫荧光显微镜可见10Ala主要在细胞质表达,WT、10Asp、151Ala、151Asp主要在细胞核表达.结论 构建的HCBP6及HCBP6不同位点模拟磷酸化的重组质粒可成功转染细胞并在细胞中高表达,HCBP6不同位点磷酸化质粒亚细胞定位不同.
文献关键词：
HCBP6;重组质粒;模拟磷酸化;亚细胞定位
中图分类号：
作者姓名：
杨雪亮;王雯;吴文娟;刘小静;李卫敏;叶峰;成军;蔺淑梅
作者机构：
西安交通大学第一附属医院 营养科,西安 710061;西安交通大学第一附属医院 感染科,西安 710061;天津市第五中心医院 呼吸科,天津300450;首都医科大学附属北京地坛医院 传染病研究所,北京 100015
文献出处：
引用格式：
[1]杨雪亮;王雯;吴文娟;刘小静;李卫敏;叶峰;成军;蔺淑梅-.HCBP6模拟磷酸化重组质粒的构建与亚细胞定位)[J].中国肝脏病杂志（电子版）,2022(01):27-33
A类：
HCBP6,模拟磷酸化,jetPRIME,10Ala,10Asp,151Ala,151Asp
B类：
亚细胞定位,绿色荧光蛋白,bp,外显子,定点突变技术,技术构建,序列比对,质粒转染,Real,Time,检测目的,目的基因,blot,荧光显微镜观察,组序列,完全一致,重组质粒构建,免疫荧光,细胞质,WT,细胞核
AB值：
0.113148
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