目的 探讨阿伐他汀对耐顺铂的人慢性髓系白血病耐药株K562/DDP化疗增敏的作用及机制.方法 取对数生长期耐顺铂的白血病细胞K562/DDP,设对照组、顺铂(5 μmol/L)组、阿托伐他汀(10 μmol/L)组、阿伐他汀(10μmol/L)+顺铂(5 μmol/L)组.采用CCK8法测定细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡作用,Westernblot方法检测羟甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(caspase-3)、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)、磷酸化丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(p-Akt)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)的表达.将p-AMPK-siRNA转染至K562/DDP细胞后,进一步采用上述方法检测p-AMPK低表达对阿伐他汀调节K562/DDP细胞凋亡及p-Akt/p-mTOR信号通路的影响.结果 CCK结果表明,随着顺铂浓度的增加,K562/DDP和K562细胞生存率逐渐降低.K562/DDP细胞的半数抑制浓度IC50值明显高于K562细胞(t=4.376,P＜0.05).流式结果显示,与单用顺铂组比较,阿伐他汀联合顺铂处理后G1期细胞比例明显升高(t=4.617,P＜0.05),S期细胞比例明显降低(t=7.277,P＜0.05);阿伐他汀联合顺铂处理后显著促进K562/DDP细胞凋亡(t=5.871,P＜0.05).Western blot结果表明,与单用顺铂组比较,阿伐他汀联合顺铂处理后显著抑制HMGCR蛋白的表达(t=4.929,P＜0.05),显著下调Bcl-2蛋白的表达(t=3.899,P＜0.05),上调Bax和caspase-3蛋白的表达(t=5.325、7.533,P均＜0.05);阿伐他汀联合顺铂处理后显著促进p-AMPK蛋白的表达(t=5.178,P＜0.05),抑制 p-Akt 和 p-mTOR 蛋白的表达(t=7.236、6.317,P 均＜0.05).进一步将 p-AMPK-siRNA 转染至K562/DDP细胞后,结果显示低表达p-AMPK减弱了阿伐他汀联合顺铂对K562/DDP细胞p-Akt/p-mTOR信号途径的抑制作用,减弱了对K562/DDP细胞凋亡的促进作用.结论 阿伐他汀具有增强慢性髓性白血病细胞株K562/DDP对顺铂化疗敏感性的作用,阻滞细胞在G1期,诱导细胞凋亡,推测机制可能通过抑制HMGCR表达,促进p-AMPK激活,抑制p-Akt/p-mTOR信号途径有关.

阿伐他汀;白血病;顺铂;耐药;AMPK/Akt/mTOR通路

刘苗;周攀

武汉大学人民医院儿科,湖北武汉430060;湖北省医疗器械质量监督检验研究院,湖北武汉430075

热带医学杂志

[1]刘苗;周攀-.阿伐他汀通过调控AMPK/Akt/mTOR信号逆转白血病顺铂耐药的作用及机制)[J].热带医学杂志,2022(04):518-524

阿伐他汀

AMPK,Akt,mTOR,顺铂耐药,慢性髓系白血病,K562,DDP,化疗增敏,对数生长期,阿托伐他汀,CCK8,细胞增殖活性,流式细胞术,细胞周期,凋亡作用,Westernblot,辅酶,还原酶,HMGCR,细胞淋巴瘤,Bcl,Bax,天冬氨酸,蛋白水解,水解酶,caspase,腺苷酸活化蛋白激酶,丝氨酸,苏氨酸蛋白激酶,磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白,siRNA,转染,低表达,半数抑制浓度,IC50,单用,G1,信号途径,慢性髓性白血病,细胞株,顺铂化疗,化疗敏感性

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