目的 探讨褪黑素(MT)联合锌(Zn)对H2 O2诱导的人视网膜色素上皮(ARPE)细胞氧化损伤的保护作用.方法 常规培养ARPE细胞株(ARPE-19),利用不同浓度H2 O2处理ARPE-19细胞,将细胞存活率接近50％的H2 O2浓度作为氧化损伤浓度.将ARPE-19细胞分为:不同浓度MT(10-5 mol·L-1、10-6 mol·L-1、10-7 mol·L-1)+ZnCl2(15μmol·L-1)组,ZnCl2组(采用15μmol·L-1 ZnCl2培养细胞),H2 O2组(不添加MT和ZnCl2培养细胞),空白对照组(细胞不做任何处理).采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况.采用试剂盒测量各组细胞内活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)的含量.ELISA检测各组细胞内白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达量.结果 当H2 O2浓度为300μmol·L-1时,细胞存活率为(54.31±1.91)％,此时细胞存活率接近50％,后续实验中均选择该浓度作为氧化损伤浓度.ZnCl2组、10-5 mol·L-1 MT+ZnCl2组、10-6 mol·L-1 MT+ZnCl2组、10-7 mol·L-1 MT+ZnCl2组细胞凋亡率分别为3.05％、1.17％、1.50％、1.71％,与空白对照组(0)相比差异均无统计学意义(均为P>0.05).H2 O2组、ZnCl2组、10-7 mol·L-1 MT+ZnCl2组细胞内ROS含量分别为空白对照组的1.76倍、1.59倍、1.41倍,差异均有统计学意义(均为P<0.05);10-5 mol·L-1 MT+ZnCl2组、10-6 mol·L-1 MT+ZnCl2组细胞内ROS含量分别为空白对照组的1.13倍和1.25倍,差异均无统计学意义(均为P>0.05).H2O2组细胞内MDA的含量较空白对照组显著提高(P<0.05);ZnCl2组、10-5 mol·L-1 MT+ZnCl2组、10-6 mol·L-1 MT+ZnCl2组、10-7 mol·L-1 MT+ZnCl2组细胞内MDA的含量均较空白对照组稍增加,差异均无统计学意义(均为P>0.05).H2 O2组、ZnCl2组、10-7 mol·L-1 MT+ZnCl2组细胞内IL-6和TNF-α的表达量均显著高于空白对照组,差异均有统计学意义(均为P<0.05);10-5 mol·L-1 MT+ZnCl2组和10-6 mol·L-1 MT+ZnCl2组细胞内IL-6和TNF-α的表达量均略高于空白对照组,差异均无统计学意义(均为P>0.05).结论 MT联合Zn能有效降低H2 O2损伤所致ARPE-19细胞内ROS的含量,随之减少细胞内MDA的含量,同时也能抑制IL-6和TNF-α的表达量,从而起到保护RPE细胞的作用.

视网膜色素上皮细胞;褪黑素;锌;氧化损伤;炎症反应

易彩霞;孙馨;印双红;黄啸

554300 贵州省铜仁市,铜仁学院大健康学院

眼科新进展

[1]易彩霞;孙馨;印双红;黄啸-.褪黑素联合锌对H2O2诱导的人视网膜色素上皮细胞氧化损伤的保护作用)[J].眼科新进展,2022(03):189-193

+ZnCl2,MT+ZnCl2

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