目的:研究黄芪含药血清对氯化钴(CoCl2)诱导人视网膜色素上皮(ARPE-19)细胞缺氧损伤的保护作用,从而探讨黄芪是否通过抗氧化应激来改善糖尿病视网膜病变(DR).方法:建立CoCl2诱导ARPE-19细胞缺氧模型,并分为以下5组:正常组(细胞正常培养,不加任何处理)、缺氧模型组(200μmol/L CoCl2)、空白血清组(200μmol/L CoCl2+空白血清)、低剂量含药血清组(200μmol/L CoCl2+10％含药血清)、高剂量含药血清组(200μmol/L CoCl2+20％含药血清).CCK-8检测细胞活性;试剂盒检测细胞上清液中还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平;ELISA检测细胞培养基中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)的含量;实时荧光定量PCR(qPCR)检测VEGF、HIF-1α和脯氨酰羟化酶-2(PHD-2)的mRNA水平;Western Blot法检测VEGF、HIF-1α和PHD-2的表达情况.结果:采用200μmol/L的CoCl2浓度可成功建立ARPE-19细胞缺氧模型.低剂量和高剂量黄芪含药血清可抑制缺氧诱导的ARPE-19细胞增殖(P<0.05),升高ARPE-19细胞缺氧损伤中GSH水平,降低MDA含量(P<0.05).低剂量和高剂量黄芪含药血清可抑制ARPE-19细胞缺氧损伤上清液中HIF-1α和VEGF的表达(P<0.05),以及ARPE-19细胞中VEGF、HIF-1α、PHD-2的mRNA表达和蛋白表达(P<0.05).结论:低剂量和高剂量黄芪含药血清通过抗氧化作用减轻CoCl2诱导ARPE-19细胞缺氧损伤.

黄芪;糖尿病视网膜病变;氧化应激;血管内皮生长因子;缺氧诱导因子-1α;人视网膜色素上皮(ARPE-19)细胞

胡晗;王晓琴;聂浩

434020 中国湖北省荆州市,长江大学附属荆州医院眼科;434023 中国湖北省荆州市,长江大学医学部

国际眼科杂志

[1]胡晗;王晓琴;聂浩-.黄芪含药血清对氯化钴诱导ARPE-19细胞缺氧损伤的保护作用)[J].国际眼科杂志,2022(06):899-903

CoCl2+,CoCl2+10,CoCl2+20

黄芪,含药血清,氯化钴,ARPE,缺氧损伤,视网膜色素上皮,抗氧化应激,糖尿病视网膜病变,DR,不加,白血,高剂量,CCK,细胞活性,试剂盒,上清液,还原型谷胱甘肽,GSH,细胞培养,缺氧诱导因子,HIF,血管内皮生长因子,VEGF,qPCR,脯氨酰羟化酶,PHD,Blot,可抑制,清通,抗氧化作用

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