典型文献
骨髓间充质干细胞来源的外泌体miR-183靶向调控视网膜脱氢酶11对视网膜色素上皮细胞的影响
文献摘要:
目的:观察骨髓间充质干细胞(BMSC)来源的外泌体上miR-183、视网膜脱氢酶11(RDH11)的表达,初步探讨两者靶向关系以及对视网膜色素上皮(RPE)细胞的影响。方法:分离培养C57BL/6(C57)小鼠BMSC,鉴定BMSC来源的外泌体。将BMSC分为空白组、模拟空白对照组(mimic-NC组)、miR-183模拟组(miR-183-mimic组)。参照文献方法培养C57小鼠、视网膜变性10(rd10)小鼠RPE细胞。来自rd10小鼠的RPE细胞转染BMSC外泌体并共培养后分为对照组、外泌体组、mimic-NC-外泌体组(mimic-NC-exo组)、miR-183-mimic-外泌体组(miR-183-mimic-exo组)。采用实时荧光定量聚合酶链反应、蛋白免疫印迹法检测C57小鼠、rd10小鼠以及各组RPE细胞中miR-183、RDH11 mRNA和蛋白相对表达量。生物信息学网站及双荧光素酶报告分析miR-183与RDH11的靶向关系。细胞计数试剂盒8检测BMSC外泌体上miR-183对RPE细胞增生的影响;原位末端标记法检测RPE细胞凋亡情况。多组间比较采用单因素方差分析。结果:与C57小鼠比较,rd10小鼠RPE中miR-183相对表达量下调,RDH11 mRNA相对表达量上调,差异均有统计学意义(
t=5.230、8.548,
P=0.006、0.001)。与空白组、mimic-NC组比较,miR-183-mimic组外泌体中miR-183 mRNA相对表达量显著上升(
F=60.130,
P<0.05)。共培养24 h时,外泌体进入RPE细胞。与mimic-NC-exo组比较,miR-183-mimic-exo组RPE细胞中miR-183 mRNA相对表达量显著升高(
t=7.311,
P=0.002),细胞增生能力增强(
F=10.949,
P=0.012)、凋亡数量减少(
t=4.571,
P=0.002),差异均有统计学意义。生物信息学网站及双荧光素酶报告证实miR-183与RDH11具有靶向关系。与mimic-NC组比较,miR-183-mimic组外泌体中RDH11 mRNA及蛋白相对表达量均降低,差异有统计学意义(
t=5.361、6.591,
P=0.006、0.003)。共培养后,与对照组比较,外泌体组RPE细胞中RDH11 mRNA及蛋白相对表达量差异无统计学意义(
t=0.169、1.134,
P=0.874、0.320);与mimic-NC-exo组比较,miR-183-mimic-exo组RPE细胞中RDH11 mRNA及蛋白相对表达量均降低,差异有统计学意义(
t=5.554、5.546,
P=0.005、0.005)。
结论:上调BMSC来源的外泌体miR-183通过靶向抑制RDH11的表达促进RPE细胞体外增生,减少细胞凋亡数量。
文献关键词:
视网膜色素上皮;骨髓细胞;间质干细胞;细胞凋亡;miR-183;视网膜脱氢酶11
中图分类号:
作者姓名:
李媛;秦廷玉;郭龙;李淑珍;侯习武
作者机构:
商丘市第一人民医院眼科, 商丘 476000;郑州大学第一附属医院眼科, 郑州 450000
文献出处:
引用格式:
[1]李媛;秦廷玉;郭龙;李淑珍;侯习武-.骨髓间充质干细胞来源的外泌体miR-183靶向调控视网膜脱氢酶11对视网膜色素上皮细胞的影响)[J].中华眼底病杂志,2022(08):688-695
A类:
RDH11,rd10
B类:
骨髓间充质干细胞,外泌体,miR,靶向调控,对视,视网膜色素上皮细胞,BMSC,RPE,分离培养,C57BL,空白对照,mimic,NC,方法培养,视网膜变性,细胞转染,共培养,exo,实时荧光定量聚合酶链反应,蛋白免疫印迹法,白相,相对表达量,双荧光素酶报告分析,试剂盒,细胞增生,末端标记,标记法,单因素方差分析,靶向抑制,细胞体,骨髓细胞,间质干细胞
AB值:
0.126729
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