目的 探讨丹参素(DSS)对脂多糖(LPS)诱导的支气管上皮16HBE细胞损伤的影响及其机制.方法 采用噻唑蓝(MTT)法检测DSS对16HBE细胞活力的影响以筛选无毒性的DSS作用浓度.用LPS诱导构建支气管上皮细胞损伤模型.将细胞分为空白组、模型组和低、中、高剂量实验组.空白组细胞正常培养,模型组以25μg·mL-1 LPS诱导细胞24 h,低、中、高剂量实验组分别向LPS诱导的细胞中加入20,40,80μmol·L-1 DSS处理24 h.以MTT法检测细胞活力;以流式细胞术检测细胞凋亡情况;以酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞炎症因子分泌和氧化应激指标含量;以二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(DCFH-DA)法检测细胞内活性氧(ROS)水平;以蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞沉默信息调节因子1(SIRT1)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)蛋白的表达水平.结果 空白组、模型组和低、中、高剂量实验组细胞存活率分别为(96.11±5.14)％,(50.23±4.30)％,(51.12±4.08)％,(60.57±4.56)％和(82.03±5.02)％;这5组的凋亡率分别为(4.36±1.03)％,(29.18±3.01)％,(27.91±3.14)％,(21.47±2.27)％和(15.15±2.03)％;这5组的ROS相对荧光强度分别为1.00±0.00,4.16±0.21,4.01±0.19,3.74±0.15和2.64±0.11;这5组的SIRT1蛋白表达水平分别为0.83±0.06,0.23±0.03,0.25±0.03,0.36±0.03和0.51±0.04;这5组的NLRP3蛋白表达水平分别为0.18±0.02,0.59±0.03,0.57±0.03,0.48±0.03和0.29±0.03.上述指标,模型组与空白组比较,中、高剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 DSS可改善LPS诱导的16HBE细胞损伤,其作用机制可能与减轻SIRT1/NLRP3通路介导的氧化应激和炎症有关.

支气管上皮细胞;脂多糖;丹参素;炎症;氧化应激

堵钧伟;徐则兰;徐钦星;应可净

浙江大学医学院附属邵逸夫医院 呼吸科,浙江杭州311400;杭州市富阳区第一人民医院 呼吸科,浙江 杭州311400

中国临床药理学杂志

[1]堵钧伟;徐则兰;徐钦星;应可净-.丹参素改善脂多糖诱导的支气管上皮细胞损伤研究)[J].中国临床药理学杂志,2022(12):1320-1324

丹参素,脂多糖,支气管上皮细胞,细胞损伤,DSS,LPS,16HBE,噻唑蓝,MTT,细胞活力,无毒性,损伤模型,高剂量,流式细胞术,酶联免疫吸附,细胞炎症因子,氧化应激指标,二氯,荧光素,乙酸酯,DCFH,DA,细胞内活性氧,ROS,蛋白质印迹法,blot,沉默信息调节因子,SIRT1,NOD,样受体,受体蛋白,NLRP3,细胞存活率,凋亡率,相对荧光强度,蛋白表达水平

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