目的 研究三七皂苷(血塞通)对H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及机制.方法 将H9 c2心肌细胞随机分成5组:对照组、模型组、低剂量实验组、高剂量实验组和核因子E2相关因子2(Nrf2)抑制剂组.对照组细胞正常培养不做任何处理;模型组调整培养基,再进行缺氧/复氧处理;低剂量实验组、高剂量实验组和Nrf2抑制剂组:用0.30,0.60 mg·mL-1血塞通溶液和0.60 mg·mL-1血塞通溶液+2μmol·L-1 Nrf2抑制剂ML385预处理后,再进行缺氧/复氧处理.检测各组细胞存活率;用比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;用流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)含量和细胞凋亡;用蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞凋亡相关蛋白及Nrf2、血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达水平.结果 对照组、模型组、低剂量实验组、高剂量实验组和Nrf2抑制剂组的细胞存活率分别为(100.00±1.23)％,(47.93±6.69)％,(63.11±5.90)％,(75.56±4.20)％和(48.27±4.63)％,凋亡率分别为(3.66±0.69)％,(69.10±4.26)％,(49.98±5.79)％,(26.44±5.78)％和(67.62±5.72)％;细胞上清LDH水平分别为(154.22±6.45),(255.47±9.37),(216.87±11.27),(185.98±14.18),(246.74±8.61)U·L-1;SOD活性分别为(34.80±3.81),(15.43±2.12),(20.83±1.11),(33.11±2.51),(21.65±2.44)U·mg-1;MDA含量分别为(1.29±0.20),(3.57±0.41),(3.19±0.22),(1.53±0.30),(3.32±0.18)nmol·mg-1;ROS相对荧光强度分别为1.07±0.17,3.88±0.61,3.16±0.31,1.65±0.26,3.19±0.28;模型组与对照组比较,高、低剂量实验组间,高、低剂量实验组与模型组比较,N rf2抑制剂组与高剂量实验组、对照组、模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).蛋白质印迹结果显示,缺氧复氧处理显著提升了H9c2细胞中cleaved-caspase 3和Bax表达水平,降低了Bcl-2表达(P<0.05).随着血塞通处理浓度的上调,cleaved-caspase 3和Bax的高表达被抑制,Bcl-2,Nrf2和HO-1的表达上调(P<0.05).加入Nrf2抑制剂后,血塞通对cleaved-caspase 3和Bax的表达抑制,Bcl-2和HO-1的表达增强功能均消失(P<0.05).结论 血塞通可能通过激活Nrf2/HO-1信号通路减轻缺氧/复氧诱导的H9 c2心肌细胞氧化损伤,发挥对心肌细胞损伤的保护作用.

三七皂苷;血塞通;H9c2大鼠心肌细胞;缺氧/复氧损伤;核因子E2相关因子2 /血红素加氧酶-1信号通路

上海市静安区市北医院 心内科,上海200435

[1]徐佩尔;颜雪芸;周乐;高乃婧;顾佳妮;陈怡;曹华明-.血塞通(三七皂苷)对缺氧/复氧诱导的H9c2心肌细胞氧化损伤的抑制作用)[J].中国临床药理学杂志,2022(02):113-117

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