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NADPH氧化酶4抑制剂对贝伐单抗诱导人RPE细胞上皮-间质转化的抑制作用
文献摘要：
目的:观察还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶4(NOX4)抑制剂对贝伐单抗诱导人视网膜色素上皮(RPE)细胞发生上皮-间质转化(EMT)的影响。方法:将人RPE细胞系ARPE-19细胞分为空白对照组、贝伐单抗组、贝伐单抗+VAS2870组和贝伐单抗+GKT137831组，其中空白对照组不做任何处理，贝伐单抗组、贝伐单抗+VAS2870组和贝伐单抗+GKT137831组培养基中分别加入0.25 g/L贝伐单抗、0.25 g/L贝伐单抗+3 μmol/L VAS2870、0.25 g/L贝伐单抗+20 μmol/L GKT137831培养72 h，VAS2870和GKT137831均为NOX4抑制剂。采用实时荧光定量PCR和Western blot法测定NOX4和EMT标志物纤维连接蛋白(FN)、波形蛋白(Vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及紧密连接相关蛋白闭锁小带蛋白-1(ZO-1)mRNA和蛋白表达水平；采用细胞免疫荧光染色法验证NOX4和EMT标志物蛋白在各组细胞中的表达情况。结果:实时荧光定量PCR和Western blot检测结果显示，空白对照组、贝伐单抗组、贝伐单抗+VAS2870组和贝伐单抗+GKT137831组细胞中FN、Vimentin、α-SMA、ZO-1和NOX4 mRNA和蛋白相对表达量总体比较差异均有统计学意义(mRNA：
F＝97.07、195.40、722.40、38.56、70.81，均
P<0.001；蛋白：
F＝23.09、64.58、58.19、26.97、63.19，均
P<0.001)，其中贝伐单抗组FN、Vimentin、α-SMA和NOX4 mRNA和蛋白相对表达量明显高于空白对照组，ZO-1 mRNA和蛋白相对表达量明显低于空白对照组，差异均有统计学意义(均
P<0.05)。贝伐单抗+VAS2870组和贝伐单抗+GKT137831组FN、Vimentin、α-SMA和NOX4 mRNA和蛋白相对表达量明显低于贝伐单抗组，ZO-1 mRNA和蛋白相对表达量明显高于贝伐单抗组，差异均有统计学意义(均
P<0.05)。免疫荧光染色结果显示，贝伐单抗组FN、Vimentin、α-SMA荧光强度强于空白对照组，ZO-1荧光强度弱于空白对照组；贝伐单抗+VAS2870组和贝伐单抗+GKT137831组FN、Vimentin、α-SMA荧光强度弱于贝伐单抗组，ZO-1荧光强度强于贝伐单抗组。
结论:NOX4参与了贝伐单抗诱导RPE细胞EMT的发生，NOX4抑制剂可减轻贝伐单抗诱导人RPE细胞的EMT程度。
文献关键词：
贝伐单抗;视网膜色素上皮细胞;上皮-间质转化;还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶-4;抑制剂
中图分类号：
作者姓名：
谢超慧;郝相慧;杨玲玲;徐海峰
作者机构：
青岛大学医学部，青岛 266071;山东省第一医科大学附属眼科研究所 山东第一医科大学附属青岛眼科医院 山东省眼科学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地，青岛 266071
文献出处：
引用格式：
[1]谢超慧;郝相慧;杨玲玲;徐海峰-.NADPH氧化酶4抑制剂对贝伐单抗诱导人RPE细胞上皮-间质转化的抑制作用)[J].中华实验眼科杂志,2022(06):507-513
A类：
+VAS2870,+GKT137831,VAS2870
B类：
NADPH,贝伐单抗,间质转化,还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸,NOX4,EMT,细胞系,ARPE,空白对照,中空,组培,别加,+3,+20,blot,纤维连接蛋白,FN,波形蛋白,Vimentin,平滑肌肌动蛋白,SMA,紧密连接,闭锁,ZO,蛋白表达水平,细胞免疫,免疫荧光染色法,白相,相对表达量,染色结果,荧光强度,可减轻,视网膜色素上皮细胞
AB值：
0.114443
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