目的 通过网络药理学方法全面系统筛选白虎加人参汤治疗2型糖尿病(T2DM)的治疗靶点及相关信号通路,并通过动物实验进一步明确其作用机制.方法 应用TCMSP、TCMID和PubChem数据库获取白虎加人参汤的化学活性成分及相关靶点信息,在GEO数据库获得影响T2DM的差异基因,并与白虎人参汤靶点交集获取共同靶点;运用STRING V11.0数据库进行蛋白互作分析并获取蛋白互作网络图及核心靶点;通过DAVID 6.8分析平台,获得GO功能注释结果及KEGG通路富集结果,分析通路相关基因及功能,并通过实验进行验证.选取MKR小鼠24只,随机分为模型组、低剂量白虎加人参汤组、高剂量白虎加人参汤组,各8只,另选取8只同龄同性别FVB小鼠作为对照组.各组给药4周后,测定小鼠空腹血糖(FBG),采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测小鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PI3K、AKT、NF-κB的蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测PI3K、AKT、NF-κB的mRNA相对表达量.结果 筛选得到白虎加人参汤中101种潜在成分和70个共同靶点,成分-靶点网络图显示白虎加人参汤可能通过VEGFA、FYN、AR、ABL1等蛋白靶点,经由磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)等信号通路发挥治疗T2DM的作用.动物实验结果显示,与模型组比较,白虎加人参汤降低MKR小鼠空腹血糖及血清中IL-6、IL-1β及TNF-α水平(P<0.05,P<0.01),下调PI3K/AKT信号通路上的PI3K、AKT、NF-κB蛋白表达及其mRNA相对表达量(P<0.01).结论 白虎加人参汤可以通过多成分、多靶点、多通路的作用效应治疗T2DM,实验证实了白虎加人参汤能够下调PI3K/AKT通路相关蛋白表达及mRNA相对表达量,降低MKR小鼠血糖和血清炎症因子水平,验证了网络药理学结果,为深入研究白虎加人参汤治疗T2DM提供了依据.

白虎加人参汤;2型糖尿病;网络药理学;分子机制;动物实验验证;MKR转基因小鼠

黄雅兰;张艳玲;吴勇军;刘秀;向琴;喻嵘

湖南中医药大学研究生院 长沙 410208;湖南中医药大学中医学院 长沙 410208;湖南中医药大学药学院 长沙 410208;湖南中医药大学科技处 长沙 410208

世界科学技术-中医药现代化

[1]黄雅兰;张艳玲;吴勇军;刘秀;向琴;喻嵘-.基于网络药理学和实验验证探讨白虎加人参汤治疗2型糖尿病的分子机制)[J].世界科学技术-中医药现代化,2022(06):2217-2229

网络药理学,白虎加人参汤,T2DM,治疗靶点,TCMSP,TCMID,PubChem,化学活性成分,GEO,差异基因,白虎人参汤,点交,交集,STRING,V11,蛋白互作分析,蛋白互作网络,网络图,核心靶点,DAVID,分析平台,功能注释,通路富集,集结,MKR,高剂量,另选,同龄,FVB,空腹血糖,FBG,酶联免疫吸附测定,小鼠血清,蛋白免疫印迹法,blot,PI3K,AKT,实时荧光定量聚合酶链式反应,qPCR,相对表达量,选得,靶点网络,VEGFA,FYN,ABL1,蛋白靶点,磷脂酰肌醇,丝裂原活化蛋白激酶,MAPK,多成分,多靶点,多通路,作用效应,血清炎症因子水平,动物实验验证,转基因小鼠

0.219285