典型文献
Cas9表达对酿酒酵母细胞生长和生产天然产物的影响及CRISPR-Cas9编辑系统的优化
文献摘要：
CRISPR-Cas9基因编辑技术在酿酒酵母中已经得到广泛的应用,但是Cas9作为外源蛋白在酿酒酵母内表达,它对酿酒酵母的生长以及生产天然产物的影响尚不明确.该研究将Cas9基因分别以整合基因组和构建到载体上的形式在酿酒酵母内表达,同时选择2种天然产物类胡萝卜素和次丹参酮二烯为目标产物,研究Cas9表达对酵母生长和生产能力的影响.结果表明,Cas9基因无论整合到基因组表达还是利用载体进行表达,Cas9对酿酒酵母的生长都会产生抑制,并以整合到基因组更为明显.当Cas9基因整合到基因组表达时,对酿酒酵母生产类胡萝卜素和次丹参酮二烯没有影响,但是当Cas9基因利用载体进行表达时,都显著降低了酿酒酵母生产类胡萝卜素和次丹参酮二烯的能力.因此为了进一步能在基因编辑后高效敲除Cas9基因,将Cas9对酿酒酵母的不利影响降到最小.该文系统研究了 Ura3载体和Trp1载体的剔除效率,并构建了能够高效进行基因编辑的质粒,优化了 CRISPR-Cas9基因编辑系统在酿酒酵母内的应用,为基于Cas9的基因编辑技术的应用提供参考.
文献关键词：
CRISPR-Cas9;酿酒酵母;编辑效率;细胞生长;天然产物
中图分类号：
作者姓名：
汤皓;程亚田;郭娟;包纪辰;黄璐琦
作者机构：
南京中医药大学药学院,江苏南京210023;中国中医科学院中药资源中心,北京100700;阿尔托大学化学工程学院,埃斯波FI-02150
文献出处：
引用格式：
[1]汤皓;程亚田;郭娟;包纪辰;黄璐琦-.Cas9表达对酿酒酵母细胞生长和生产天然产物的影响及CRISPR-Cas9编辑系统的优化)[J].中国中药杂志,2022(15):4066-4073
A类：
Ura3,Trp1
B类：
Cas9,酿酒酵母,酵母细胞,细胞生长,天然产物,CRISPR,基因编辑技术,外源蛋白,种天然,类胡萝卜素,丹参酮,生产能力,合到,基因整合,敲除,除效率,质粒,编辑效率
AB值：
0.138329
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