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嗜黏蛋白阿克曼菌脂多糖对小鼠巨噬细胞的影响
文献摘要：
目的 提取、鉴定嗜黏蛋白阿克曼菌(Akkermansia muciniphila,AKK)的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS),初步探讨AKK的LPS对小鼠巨噬细胞的影响.方法 试剂盒法提取AKK的LPS并纯化,ELISA法定量;BCA法、紫外分光光度法、SDS-PAGE和银染鉴定提取的LPS的纯度和结构;量试剂法检测LPS活性.体外培养小鼠巨噬细胞RAW 264.7,分为正常对照组、大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)LPS组和AKK LPS组.经LPS作用后,CCK-8法检测细胞活性;RT-qPCR测定NF-κB、IL-1β、IL-6、TNF-a的m11RNA表达水平.结果 纯化的细菌LPS平均产率为7.14％,蛋白、核酸含量分别为0.005 6‰和2.12％;银染结果显示AKK的LPS条带分布与E.coli的LPS不同;鲎试剂测定其活性为7.10 x 107 EU/ml;部分干预浓度下,AKK LPS干预组细胞存活率低于E.coli LPS组;刺激6 h、12 h、24 h后,与正常对照组相比,AKKLPS干预组细胞内NF-κB的mRNA表达水平在干预6 h后显著上调,差异具有统计学意义(Z=-3.606,P=0.001);两种LPS干预组的IL-1β、TNF-α、IL-6的mRNA表达水平在各时间点均高于对照组.结论 提取的AKK的LPS纯度较高,生物活性良好;AKK的LPS干预小鼠巨噬细胞,上调相关炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α及早期核转录因子NF-κB的转录表达.
文献关键词：
嗜黏蛋白阿克曼菌;脂多糖;NF-κB;IL-1β
中图分类号：
作者姓名：
陈静;刘雪;邓思思;查碧晴;张翔凌;王国庆
作者机构：
四川大学华西公共卫生学院/华西第四医院,四川成都610041
文献出处：
引用格式：
[1]陈静;刘雪;邓思思;查碧晴;张翔凌;王国庆-.嗜黏蛋白阿克曼菌脂多糖对小鼠巨噬细胞的影响)[J].现代预防医学,2022(20):3788-3793
A类：
m11RNA,AKKLPS
B类：
嗜黏蛋白阿克曼菌,脂多糖,小鼠巨噬细胞,Akkermansia,muciniphila,lipopolysaccharide,试剂盒法,BCA,紫外分光光度法,SDS,PAGE,银染,体外培养,RAW,正常对照,大肠杆菌,Escherichia,coli,CCK,细胞活性,qPCR,酸含量,条带,鲎试剂,EU,ml,细胞存活率,调相,核转录因子,转录表达
AB值：
0.210089
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