目的 探究马钱苷对脑缺血再灌注损伤(CIRI)的保护效果及作用机制.方法 采用线栓法构建SD大鼠CIRI模型,分为假手术组、CIRI组、CIRI+马钱苷低剂量(5 mg/kg)组、CIRI+马钱苷中剂量(10 mg/kg)组、CIRI+马钱苷高剂量(15 mg/kg)组,其中假手术组仅分离颈总动脉、颈外动脉,不进行栓塞.CIRI+马钱苷低、中、高剂量组分别给予不同剂量马钱苷,假手术组与CIRI组给予0.9％氯化钠溶液,连续给药7 d.TTC法、Tunel染色法观察大鼠脑组织梗死率和神经细胞凋亡情况;ELISA法测定大鼠血清IL-1β、IL-6和TNF-α含量.采用氧糖剥夺/复氧(OGD/R)法构建神经瘤母细胞(N2a)CIRI模型,分为正常对照组、OGD/R组、OGD/R+马钱苷低剂量(10μmol/L)组、OGD/R+马钱苷中剂量(20μmol/L)组和OGD/R+马钱苷高剂量(30μmol/L)组,干预24 h.乳酸脱氢酶(LDH)法测定细胞LDH释放率,流式细胞术测定细胞凋亡情况.qRT-PCR法分别测定各组大鼠脑组织和各组N2a中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2关联X基因(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA表达水平,Western blot法分别测定各组大鼠脑组织和各组N2a中NF-κB、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38/p38)、活化Caspase-3/Caspase-3(cleaved-Caspase-3/Caspase-3)蛋白表达水平.结果 与假手术组相比,CIRI组大鼠脑梗死率和神经细胞凋亡率升高(均P<0.01),血清IL-1β、IL-6和TNF-α质量浓度均升高(均P<0.01),Bcl-2 mRNA表达水平降低(P<0.01),Bax、Caspase-3 mRNA和NF-κB、p-p38/p38、cleaved-Caspase-3/Caspase-3蛋白表达水平均升高(均P<0.01);相比CIRI组,CIRI+马钱苷中、高剂量组大鼠脑梗死率和神经细胞凋亡率均下降(均P<0.05),血清IL-1β、IL-6和TNF-α质量浓度均降低(均P<0.05),NF-κB、p-p38/p38、cleaved-Caspase-3/Caspase-3蛋白表达均降低(均P<0.05);CIRI+马钱苷低、中、高剂量组Bcl-2 mRNA表达水平均升高(均P<0.05),Bax、Caspase-3 mRNA表达水平均降低(均P<0.05).与正常对照组相比,OGD/R组细胞LDH释放率和凋亡率均增加(均P<0.01),Bcl-2 mRNA表达水平降低(P<0.05),Bax、Caspase-3 mRNA和NF-κB、p-p38/p38、cleaved-Caspase-3/Caspase-3蛋白表达水平均升高(均P<0.01);相比OGD/R组,OGD/R+马钱苷中、高剂量组细胞LDH释放率和凋亡率均降低(均P<0.01),NF-κB、p-p38/p38、cleaved-Caspase-3/Caspase-3蛋白表达水平均降低(均P<0.05);OGD/R+马钱苷低、中、高剂量组Bcl-2 mRNA表达水平均升高(均P<0.05),Bax、Caspase-3 mRNA表达水平均降低(均P<0.05).结论 马钱苷可通过调控p38/NF-κB信号通路抑制炎症反应,减少神经细胞凋亡来改善体内外CIRI.

马钱苷;脑缺血再灌注损伤;p38/NF-κB;凋亡;炎症反应

徐小雯;李哲明;应夏丽

311700 杭州,淳安县第一人民医院中药房;杭州医学院药学院;311700 杭州,淳安县第一人民医院药剂科

浙江医学

[1]徐小雯;李哲明;应夏丽-.马钱苷在脑缺血再灌注损伤中的作用及机制)[J].浙江医学,2022(23):2490-2498,后插2

CIRI+

马钱苷,脑缺血再灌注损伤,保护效果,线栓法,假手,高剂量,颈总动脉,颈外动脉,栓塞,不同剂量,氯化钠溶液,连续给药,TTC,Tunel,染色法,大鼠脑组织,神经细胞凋亡,大鼠血清,氧糖剥夺,复氧,OGD,神经瘤母细胞,N2a,正常对照,R+,乳酸脱氢酶,LDH,释放率,流式细胞术,qRT,Bcl,Bax,半胱氨酸蛋白酶,Caspase,blot,磷酸化,p38,丝裂原活化蛋白激酶,cleaved,蛋白表达水平,脑梗死率,细胞凋亡率,平降,抑制炎症,善体,体内外

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