目的 研究LncRNA GAS6-AS1对脑胶质瘤T98G细胞增殖及其放疗敏感性的影响.方法 RT-qPCR技术分析脑胶质瘤组织、癌旁组织和X射线照射的T98G细胞中LncRNA GAS6-AS1、miR-324-3p基因表达.分别下调T98G细胞中GAS6-AS1或miR-324-3p的表达后,利用X射线照射细胞,分析GAS6-AS1表达下调对T98G细胞增殖、侵袭和凋亡的影响.miRcode和双荧光素酶报告基因实验检测LncRNA GAS6-AS1和miR-324-3p之间的相互关系.同时上调LncRNA GAS6-AS1与miR-324-3p在T98G细胞中的表达,进一步分析T98G细胞增殖、侵袭和放疗敏感性.Western blot检测miR-324-3p对Wnt/β-catenin通路的影响.分析miR-153-3p通过Wnt/β-catenin通路对T98G细胞增殖、侵袭和放疗敏感性的影响.结果 与癌旁正常组织比较,脑胶质瘤组织中LncRNA GAS6-AS1 mRNA表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.01).2、4、6 Gy X射线照射T98G细胞后中GAS6-AS1 mRNA表达低于0 Gy剂量X射线照射(P<0.05).下调LncRNA GAS6-AS1表达后,GAS6-AS1 mRNA表达明显降低(P<0.01).下调GAS6-AS1表达后,T98G细胞活力降低(P<0.01),细胞侵袭数目减少.6 Gy X射线照射细胞后活力明显降低(P<0.05),细胞凋亡率显著升高;下调GAS6-AS1表达后并用6 Gy X射线照射细胞,活力明显降低(P<0.05),细胞凋亡率明显升高.GAS6-AS1 wt+miR-324-3p mimics组荧光素酶活性显著低于mimics NC+GAS6-AS1 wt组(P<0.01).与癌旁正常组织比较,脑胶质瘤组织中miR-324-3p mRNA表达显著降低(P<0.01).2、4、6 Gy X射线照射T98G细胞后中miR-324-3p mRNA表达高于0 Gy剂量X射线照射(P<0.05).上调GAS6-AS1和miR-324-3p表达后,GAS6-AS1、miR-324-3p mRNA表达明显升高(P<0.01).与pcDNA-3.1(+)+mimics NC组比较,pcDNA-GAS6-AS1+mimics NC组T98G细胞活力和侵袭数目显著升高(P<0.05),pcDNA-3.1(+)+miR-324-3p mimics组细胞活力和侵袭数目显著降低(P<0.05);与pcDNA-3.1(+)+miR-324-3p mimics组比较,pcDNA-GAS6-AS1+miR-324-3p mimics组细胞活力和侵袭数目显著升高(P<0.05).与pcDNA-3.1(+)+mimics NC+6 Gy组比较,pcDNA-GAS6-AS1+mimics NC+6 Gy组细胞活力明显上升,细胞凋亡率明显降低(P<0.05);pcDNA-3.1(+)+miR-324-3p mimics+6 Gy组细胞活力明显降低,细胞凋亡率明显上升(P<0.05);与pcDNA-3.1(+)+miR-324-3p mimics+6 Gy组比较,pcDNA-GAS6-AS1+miR-324-3p mimics+6 Gy组细胞活力明显上升,细胞凋亡率明显降低(P<0.05).与mimics NC组比较,miR-324-3p mimics组细胞内β-catenin和CyclinD1蛋白表达显著降低,β-catenin/GAPDH、CyclinD1/GAPDH比值显著降低(P<0.01).与inhibitor NC组比较,miR-324-3p inhibitor组细胞内 β-catenin和CyclinD1蛋白表达显著升高,β-catenin/GAPDH、CyclinD1/GAPDH比值显著升高(P<0.01).与inhibitor NC组比较,miR-324-3p inhibitor转染T98G细胞48 h后增殖活力显著上调(P<0.05),细胞侵袭数目明显增加(P<0.01);与miR-324-3p inhibitor组比较,miR-324-3p inhibitor+XAV939组细胞增殖活力显著降低(P<0.05),细胞侵袭数目明显减少(P<0.01).用6 Gy X射线照射T98G细胞后,与inhibitor NC组比较,miR-324-3p inhibitor组细胞增殖活力显著上调(P<0.05),细胞凋亡率明显降低(P<0.01),与miR-153-3p inhibitor组相比,miR-153-3p inhibitor+XAV939组细胞增殖活力显著降低(P<0.05),细胞凋亡率明显升高(P<0.01).结论 LncRNA GAS6-AS1靶向miR-324-3p激活Wnt/β-catenin通路促进了T98G细胞增殖,降低了放疗敏感性.

LncRNA GAS6-AS1;miR-324-3p;脑胶质瘤;增殖;放疗敏感性

徐华;张海萍;王虹伊;赵钦;郭巧宁;马蕾;陆军

710100 西安市,西安国际医学中心医院放射治疗中心;西安交通大学第一附属医院

河北医药

[1]徐华;张海萍;王虹伊;赵钦;郭巧宁;马蕾;陆军-.LncRNA GAS6-AS1靶向miR-324-3p激活Wnt/β-catenin通路调控脑胶质瘤细胞增殖及放疗敏感性的研究)[J].河北医药,2022(19):2885-2890

wt+miR,NC+GAS6,AS1+mimics,NC+6,mimics+6,inhibitor+XAV939

LncRNA,3p,Wnt,catenin,脑胶质瘤细胞,放疗敏感性,T98G,qPCR,癌旁组织,别下,miRcode,双荧光素酶报告基因实验,实验检测,blot,正常组织,Gy,细胞活力,细胞侵袭,细胞凋亡率,荧光素酶活性,pcDNA,AS1+miR,CyclinD1,GAPDH,转染,细胞增殖活力

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