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一种基于突变型IgG4长铰链区和4-1BB共刺激域的靶向CD19 CAR-T细胞构建及抗白血病的功能研究
文献摘要：
目的:构建一种基于突变型IgG4长铰链区和4-1BB共刺激域的靶向CD19 CAR-T细胞(CART19),并在体内和体外证明其抗肿瘤的能力.方法:构建CD19 CAR的逆转录病毒载体,逆转录病毒转导植物血球凝集素(PHA)刺激的健康志愿者T细胞,从而获得CART19细胞;采用流式细胞术和Western blot检测转导效率;采用流式细胞术检测细胞内CD107a和IFN-γ水平,以及CFSE染色后的细胞增殖情况;4 h荧光杀伤实验评估CART19细胞的体外抗肿瘤能力;ELISA法检测共培养上清液的IFN-γ释放水平;建立白血病小鼠模型评估CART19细胞的体内抗肿瘤作用.结果:成功构建了一种新的CART19细胞;CD19+细胞可以特异性刺激CART19细胞表达CD107a和IFN-γ、促进CART19细胞增殖以及分泌IFN-γ;4 h共培养荧光杀伤实验显示CART19细胞对NALM6-GL具有良好的体外抗肿瘤活性;CART19细胞可以显著提高白血病小鼠的生存率.结论:成功构建了可以有效治疗CD19+肿瘤的基于突变型IgG4长铰链区和4-1BB共刺激域CART19细胞,为下一步临床治疗奠定了基础.
文献关键词：
嵌合抗原受体T细胞;CD19;突变型IgG4长铰链区;4-1BB共刺激域;白血病
中图分类号：
作者姓名：
张灿;安志静;白玥;王琛琛;钟晓松
作者机构：
首都医科大学附属北京世纪坛医院临床基因与细胞工程中心,北京100038
文献出处：
引用格式：
[1]张灿;安志静;白玥;王琛琛;钟晓松-.一种基于突变型IgG4长铰链区和4-1BB共刺激域的靶向CD19 CAR-T细胞构建及抗白血病的功能研究)[J].中国免疫学杂志,2022(16):1988-1992
A类：
CART19,NALM6
B类：
突变型,IgG4,铰链,1BB,共刺激,白血病,功能研究,逆转录病毒载体,血球,凝集素,PHA,健康志愿者,流式细胞术,blot,转导效率,CD107a,IFN,CFSE,杀伤,实验评估,共培养,养上,上清液,放水,立白,小鼠模型,模型评估,体内抗肿瘤,抗肿瘤作用,CD19+,性刺激,GL,体外抗肿瘤活性,嵌合抗原受体
AB值：
0.239648
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