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雷帕霉素对JAK2 V617F阳性HEL细胞增殖凋亡及PD-1/PD-L1信号通路的影响
文献摘要：
目的:探究雷帕霉素(Rapa)对JAK2 V617F阳性HEL细胞增殖凋亡及程序性死亡受体1与其配体(PD-1/PD-L1)的影响.方法:体外培养JAK2 V617F突变阳性的人红白血病HEL细胞,分别加入浓度为10nM、50nM和100nM的Rapa,设立对照组,CCK-8检测细胞增殖抑制率.Caspase 3/7活性检测试剂盒检测各组细胞Caspase 3/7活性,Transwell小室观察各组细胞迁移能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况及P D-1/P D-L1表达情况,实时荧光定量聚合酶链反应检测各组细胞中JAK2和P D-1、PD-L1 mRNA变化,蛋白质印迹法检测各组哺乳类雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达.选取5名健康志愿者,分离其淋巴细胞与HEL细胞共培养,加入不同浓度的Rapa,流式细胞术检测各组Treg细胞数量变化.结果:CCK-8检测结果显示:不同终浓度Rapa(10nM、50nM、100nM)在72h时对细胞增殖抑制率分别为(33.33±4.6)％、(49.12±3.72)％、(55.16±4.14)％(P<0.05).在浓度50nM和100nM的Rapa作用HEL细胞24h后,其Caspase 3/7活性较对照组显著升高(均P<0.05),流式细胞术结果显示与对照组相比细胞凋亡率明显增加(P<0.05),PD-L1蛋白表达较对照组明显下降(P<0.05),JAK2和PD-L1 mRNA表达量较对照组显著下调(P<0.01).健康志愿者淋巴细胞与HEL细胞共培养24h后,其Treg细胞增加(P<0.05),而加入Rapa可使Treg细胞呈剂量依赖性下调(P<0.05).蛋白质印迹法检测结果显示Rapa能够剂量依赖性抑制mTOR蛋白表达.结论:Rapa可能通过影响mTOR进而干扰JAK2通路,导致HEL细胞增殖受抑,PD-L1表达减低,Treg细胞受抑.
文献关键词：
雷帕霉素;JAK2 V617F;程序性死亡受体1
中图分类号：
作者姓名：
齐林;王蕊;谢旭磊;张朝;成志勇;付建珠
作者机构：
承德医学院研究生院, 河北 承德 067000;河北省石家庄市第四医院内科, 河北 石家庄 050000;河北省保定市第一医院血液内科, 河北 保定 071000
文献出处：
引用格式：
[1]齐林;王蕊;谢旭磊;张朝;成志勇;付建珠-.雷帕霉素对JAK2 V617F阳性HEL细胞增殖凋亡及PD-1/PD-L1信号通路的影响)[J].河北医学,2022(05):705-710
A类：
10nM,50nM,100nM
B类：
JAK2,V617F,HEL,增殖凋亡,L1,Rapa,程序性死亡受体,体外培养,红白,白血病,别加,CCK,增殖抑制,抑制率,Caspase,活性检测,检测试剂盒,Transwell,小室,细胞迁移能力,流式细胞术,实时荧光定量聚合酶链反应,聚合酶链反应检测,蛋白质印迹法,哺乳类,雷帕霉素靶蛋白,mTOR,健康志愿者,细胞共培养,Treg,细胞数量,数量变化,72h,24h,细胞凋亡率,剂量依赖,量依赖性,减低
AB值：
0.185475
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