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钠碘转运体报告基因共表达对嵌合型受体T细胞体外增殖及杀伤能力的影响
文献摘要：
目的 探讨钠碘转运体(NIS)报告基因的共表达对嵌合型受体T(CAR-T)细胞体外增殖和杀伤活性的影响.方法 慢病毒感染法制备CAR-T细胞(仅表达CD19 CAR的T细胞)、NIS-T细胞(仅表达NIS报告基因的T细胞)和NIS-CAR-T细胞(共表达NIS和CD19 CAR的T细胞),然后按T细胞蛋白表达情况分为4组:T细胞组(未转染的T细胞)、CAR-T组、NIS-T组、NIS-CAR-T组.流式细胞术检测各组NIS和CAR转染率.各组细胞常规培养24、48、72 h,CCK-8法检测增殖能力.各组T细胞为效应细胞,Nalm6肿瘤细胞为靶细胞,按效靶比0.5:1、1:1、2:1、4:1共培养24、48、72 h,乳酸脱氢酶细胞毒性检测法(LDH)检测各组细胞对肿瘤细胞的杀伤率,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测共培养上清液中各组细胞因子人干扰素-γ(IFN-γ)和人肿瘤坏死因子-β(TNF-β)释放水平.摄碘实验检测表达NIS蛋白各组细胞的NIS功能.结果 CAR-T细胞、NIS-CAR-T细胞的CAR转染率分别为91.91％、99.41％,NIS-T细胞、NIS-CAR-T细胞的NIS转染率分别为47.83％、50.24％.常规培养24、48、72 h CAR-T细胞与NIS-CAR-T细胞增殖率差异无统计学意义(P>0.05).0.5:1、1:1、2:1和4:1效靶比作用24 h时CAR-T细胞杀伤率(％)均高于NIS-CAR-T细胞(P<0.05),作用48 h和72 h时两组杀伤率差异均无统计学意义(P>0.05).CAR-T细胞与NIS-CAR-T细胞均存在IFN-γ和TNF-β释放现象,释放水平均高于对照组(P<0.05).NIS-T细胞与NIS-CAR-T细胞均具有特异性摄碘能力,二者间摄碘能力差异无统计学意义(P>0.05),但均高于对照组T细胞(P<0.05).结论 NIS报告基因的共表达不影响CAR-T细胞中CAR转染率,对细胞增殖和杀伤活性无抑制现象.
文献关键词：
CAR-T细胞;钠碘转运体;基因表达;体外增殖;杀伤活性
中图分类号：
作者姓名：
田川卉子;黄普凤;何雨佳;王亮;彭志平
作者机构：
重庆医科大学基础医学院放射医学教研室,重庆 400014
文献出处：
引用格式：
[1]田川卉子;黄普凤;何雨佳;王亮;彭志平-.钠碘转运体报告基因共表达对嵌合型受体T细胞体外增殖及杀伤能力的影响)[J].南方医科大学学报,2022(07):1062-1068
A类：
B类：
钠碘转运体,报告基因,共表达,嵌合型,细胞体,体外增殖,NIS,CAR,杀伤活性,慢病毒感染,CD19,转染,流式细胞术,规培,CCK,效应细胞,Nalm6,肿瘤细胞,靶细胞,共培养,乳酸脱氢酶,细胞毒性,毒性检测,检测法,LDH,酶联免疫吸附试验,养上,上清液,人干扰素,IFN,人肿瘤坏死因子,放水,实验检测,细胞增殖率,比作,能力差异
AB值：
0.209033
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