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典型文献
两种方法提取人脐带间充质干细胞三维培养生物学特性的比较
文献摘要:
背景:人脐带间充质干细胞提取方法主要有酶消化法和组织块贴壁法,明确两种方法提取的细胞在二维、三维培养下的生物学特性,对组织工程中种子细胞提取方法及培养方式的选择具有重要意义.目的:比较酶消化法和组织块贴壁法提取的人脐带间充质干细胞在二维、三维培养下的生物学特性.方法:酶消化法和组织块贴壁法分离人脐带间充质干细胞,扩增培养至第3代进行二维、三维培养;扫描电镜观察细胞球表征;死活染色观察细胞球存活情况;Alamar Blue检测细胞增殖能力;流式细胞术检测免疫表型CD34、CD44、CD45、CD90、CD105的表达;免疫荧光、免疫印迹检测多能性转录因子Sox2、Nanog、Oct4表达.结果 与结论:①酶消化法比组织块贴壁法获取细胞时间更短,二维培养下组织块贴壁法的细胞增殖能力优于酶消化法,但在三维培养条件下细胞增殖缓慢且无差异.三维培养3 d后细胞成紧密球体,存活良好.②两种方法提取的细胞在二维、三维培养条件下均表达CD44、CD90、CD105,不表达CD34、CD45.二维培养下,酶消化法提取细胞的CD105表达高于组织块贴壁法;三维培养下,酶消化法提取细胞的CD90、CD105表达也高于组织块贴壁法.③二维和三维培养下两种方法提取细胞均表达多能性转录因子Sox2、Nanog、Oct4.二维培养下,酶消化法提取细胞3个转录因子表达均高于组织块贴壁法;但三维培养下,组织块贴壁法提取细胞Sox2的表达高于酶消化法,Nanog、Oct4的表达两组间无差异.
文献关键词:
干细胞;脐带;间充质干细胞;三维培养;细胞球;生物学特性;免疫表型;转录因子
作者姓名:
陈思铭;胡加伟;李丽丽;伍永强;彭维杰
作者机构:
赣南医学院,江西省赣州市 341000
引用格式:
[1]陈思铭;胡加伟;李丽丽;伍永强;彭维杰-.两种方法提取人脐带间充质干细胞三维培养生物学特性的比较)[J].中国组织工程研究,2022(19):2997-3003
A类:
B类:
人脐带间充质干细胞,生物学特性,细胞提取,酶消化法,组织块贴壁法,组织工程,种子细胞,培养方式,离人,扩增培养,电镜观察,细胞球,死活,存活情况,Alamar,Blue,细胞增殖能力,流式细胞术,免疫表型,CD34,CD44,CD45,CD90,CD105,免疫荧光,免疫印迹,Sox2,Nanog,Oct4,三维培养条件,球体
AB值:
0.177335
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