目的:探讨Ghrelin联合LY294002对脂肪间充质干细胞(ADSCs)神经分化的影响,并阐明其作用机制.方法:倒置相差显微镜下观察ADSCs形态表现,流式细胞术鉴定ADSCs表面抗体阳性表达率,将第4代ADSCs分为对照组(不进行干预)、LY294002组[给予40μmol·L-1磷酸酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路特异抑制剂LY294002]、Ghrelin组(给予0.1μmol·L-1 Ghrelin)、Ghrelin+LY294002组(给予40μmol·L-1 LY294002+0.1μmol·L-1 Ghrelin).倒置相差显微镜下观察各组ADSCs神经分化后的形态表现,免疫荧光染色法检测各组ADSCs中神经元特异性烯醇化酶(NSE)、巢蛋白(Nestin)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞百分率,Western blotting法检测各组ADSCs中PI3K/Akt通路蛋白表达水平,并计算磷酸化PI3K(p-PI3K)/PI3K和磷酸化Akt(p-Akt)/Akt比值.结果:ADSCs表面抗体CD90和CD13高表达,CD34、CD45和CD106低表达.与对照组比较,LY294002组仅部分细胞由长梭形转变为类圆形胞体,突起较短、数量减少,而Ghrelin组细胞由长梭形转变为类圆形胞体速度增快;与LY294002组比较,Ghrelin+LY294002组细胞由长梭形转变为类圆形胞体速度增快,且突起数量增加.与对照组比较,LY294002组ADSCs中NSE和Nestin阳性细胞百分率及p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt比值明显降低(P<0.05),Ghrelin组ADSCs中NSE和Nestin阳性细胞百分率及p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt比值升高(P<0.05);与LY294002组比较,Ghrelin+LY294002组ADSCs中NSE和Nestin阳性细胞百分率及p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt比值升高(P<0.05);各组ADSCs中GFAP阳性细胞百分率比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:Ghrelin通过激活PI3K/Akt通路促进ADSCs神经分化.

Ghrelin;LY294002;脂肪间充质干细胞;神经分化;磷酸酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路

杨贺然;李兴江;胡嘉航;李彦伟

牡丹江医学院附属红旗医院检验科,黑龙江 牡丹江 157000;牡丹江医学院解剖教研室,黑龙江 牡丹江 157000;牡丹江医学院附属红旗医院影像科,黑龙江 牡丹江 157000

吉林大学学报（医学版）

[1]杨贺然;李兴江;胡嘉航;李彦伟-.Ghrelin对脂肪间充质干细胞神经分化的影响)[J].吉林大学学报（医学版）,2022(06):1490-1497

Ghrelin+LY294002,LY294002+0

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