典型文献
miR-124-3p靶向Axin1调控糖尿病骨质疏松成骨的研究
文献摘要:
目的 研究miR-124-3p靶向Axin1调控糖尿病骨质疏松症大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的作用.方法 20只糖尿病大鼠模型-SPF级SD雌性大鼠分为分组对照组10例、实验组10例,经过药物注射,测血生化指标,测骨密度.BMSCs培养,流式细胞学鉴定.检测对照组和实验组miR-124-3p mRNA的表达.过表达miR-124-3p(模拟物)7、14、21 d,检测ALP、茜素红染色成骨能力.第7天检测miR-124-3p mRNA表达水平.实验组细胞用miR-124-3p模拟物转染,分为高糖组和低糖组,检测中Axin1 mRNA水平.构建载体,与模拟物共转染,荧光素酶报告基因检测miR-124-3p和Axin1靶向结合.将实验组BMSCs分为高糖组和低糖组,检测实验组BMSCs高糖组及低糖组miR-124-3p、Runx2 mRNA的表达及茜素红染色和ALP染色结果.检测实验组模拟物在高糖组及低糖组miR-124-3p、Runx2 mRNA的表达及茜素红染色和ALP染色结果.结果 ELISA检测血生化指标,实验组TG、TC、FPG、HbA1C值上调,β-CTX和SOST上调,OC和骨密度下调.BMSCs培养,流式细胞学鉴定显示CD73和CD105的表达为阳性,CD34和CD45的表达呈阴性.符合间充质干细胞的抗原特点,证实为BMSCs.实验组miR-124-3p表达明显低于对照组.过表达miR-124-3p(模拟物)7、14、21 d,ALP、茜素红染色随时间逐渐升高.第7天miR-124-3p表达水平显著升高.实验组细胞用miR-124-3p模拟物转染,结果高糖组Axin1 mRNA表达水平上调,但用miR-124-3p模拟物转染时水平下降.荧光素酶报告基因检测miR-124-3p和Axin1可以靶向结合.RT-qPCR检测实验组BMSCs高糖摄入显著降低了miR-124-3p、Runx2表达;高糖可抑制成骨分化,减少钙沉积,减少ALP表达.高血糖条件下miR-124-3p过表达(模拟物)中Runx2的表达显示,高糖+对照明显低于低糖+对照组;高糖+miR-124-3p模拟物明显高于高糖+对照组.茜素红染色和ALP染色显示,高糖+对照明显低于低糖+对照组;高糖+miR-124-3p模拟物明显高于高糖+对照组.结论 miR-124-3p能通过靶向抑制Axin1促进糖尿病骨质疏松症大鼠BMSC的成骨发生.
文献关键词:
miR-124-3p;Axin1;糖尿病骨质疏松症;BMSC
中图分类号:
作者姓名:
王斌;麦彩园;汪志中;李新旭;董俊球
作者机构:
佛山市三水区人民医院骨科,广东 佛山528100;广东省妇幼保健院产科,广东 广州510010
文献出处:
引用格式:
[1]王斌;麦彩园;汪志中;李新旭;董俊球-.miR-124-3p靶向Axin1调控糖尿病骨质疏松成骨的研究)[J].中国骨质疏松杂志,2022(09):1297-1302,1315
A类:
B类:
3p,Axin1,糖尿病骨质疏松症,骨髓间充质干细胞,bone,marrow,mesenchymal,stem,cells,BMSCs,成骨分化,糖尿病大鼠,大鼠模型,SPF,雌性大鼠,药物注射,血生化指标,骨密度,流式细胞学,过表达,ALP,茜素红,高糖,低糖,共转染,荧光素酶报告基因,基因检测,Runx2,染色结果,FPG,HbA1C,CTX,SOST,OC,CD73,CD105,CD34,CD45,时水,qPCR,摄入,可抑制,高血糖,照明,+miR,靶向抑制
AB值:
0.19669
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