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典型文献
褪黑素对H2O2诱导的成骨细胞氧化应激损伤的保护作用
文献摘要:
目的 探讨褪黑素对H2O2诱导的成骨细胞氧化应激损伤的保护作用机制.方法 取24 h内新生SD大鼠10只,采用组织块贴壁法提取原代成骨细胞并行差速贴壁提纯细胞.细胞传至第2代时行碱性磷酸酶及茜素红染色进行鉴定.将鉴定后的成骨细胞用不同浓度的H2O2作用不同时间并行CCK8试验检测细胞增殖情况.选择合适的浓度和时间建立氧化应激损伤模型,并用褪黑素及EX527进行干预.实验分为对照组、H2O2组、褪黑素组及EX527组.分别对四组细胞行碱性磷酸酶染色、茜素红染色,检测四组细胞活性氧、丙二醛、超氧化物歧化酶含量,同时用流式细胞仪检测四组细胞凋亡率,免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl2和成骨相关蛋白BMP2、RUNX2以及SIRT1和p66SHC的表达量.结果 经鉴定,成功提取原代成骨细胞.CCK8结果显示,400μmol/L H2O2作用4 h成骨细胞活性降至52%,适宜用于建立氧化应激损伤模型.H2O2作用后成骨细胞活性及矿化能力降低,ROS含量、MDA含量升高,SOD活性降低,细胞凋亡率升高,伴随有SIRT1、BMP2、RUNX2、Bcl2表达降低,p66SHC和Bax表达升高.褪黑素预处理后缓解了H2O2对成骨细胞的氧化应激损伤作用,部分恢复了成骨细胞的活性及矿化能力,SIRT1抑制剂EX527能够逆转褪黑素的上述作用.结论 褪黑素通过调节SIRT1/p66SHC通路来抑制H2O2诱导的成骨细胞的氧化应激损伤并促进成骨.
文献关键词:
褪黑素;成骨细胞;氧化应激;骨质疏松;SIRT1/p66SHC通路
作者姓名:
刘合栋;任茂贤;李杨;蒋文凯;周志;杨民
作者机构:
皖南医学院第一附属医院/弋矶山医院创伤骨科,安徽 芜湖241001
引用格式:
[1]刘合栋;任茂贤;李杨;蒋文凯;周志;杨民-.褪黑素对H2O2诱导的成骨细胞氧化应激损伤的保护作用)[J].中国骨质疏松杂志,2022(08):1093-1098
A类:
p66SHC
B类:
褪黑素,H2O2,成骨细胞,氧化应激损伤,保护作用机制,组织块贴壁法,原代,差速,提纯,代时,时行,碱性磷酸酶,茜素红,CCK8,试验检测,损伤模型,EX527,四组,酶含量,流式细胞仪,细胞凋亡率,免疫印迹法,凋亡相关蛋白,Bax,Bcl2,骨相,BMP2,RUNX2,SIRT1,骨细胞活性,矿化,ROS,损伤作用,述作,促进成骨,骨质疏松
AB值:
0.194577
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