目的 探讨艾柱燃烧产物(moxa smoke extract,MSE)对蓝光诱导人视网膜色素上皮(adult retinal pigment epithelium-19,ARPE-19)细胞损伤的保护作用及其作用机制.方法 体外培养ARPE-19细胞,CCK-8法检测不同质量浓度(0.25、0.50、1.00、2.00、4.00、5.00、10.00、50.00、100.00、150.00 μg/mL)MSE 对 ARPE-19 细胞活力的影响.设置对照组、对照+MSE高剂量组、蓝光组、蓝光+叶黄素组、蓝光+MSE低剂量组和蓝光+MSE高剂量组.对照组和蓝光组加入空白培养基,其余4组分别加入相应的含药培养基干预24 h后,除对照组以及对照+MSE高剂量组外,各组均在蓝光(430 nm,96.1 W/m2)下刺激lh.建立ARPE-19细胞损伤模型后,采用乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)法检测质膜完整性;采用倒置荧光显微镜观察细胞形态学变化;采用流式细胞仪检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;采用试剂盒检测细胞内氧化应激指标丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、过氧化氢酶(catalase,CAT)以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;采用Western blotting法检测丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPK)信号通路相关蛋白表达.结果 与对照组相比,MSE(0.25-4.00 μg/mL)对ARPE-19细胞活力没有显著影响.与蓝光组相比,MSE可以显著降低培养上清中的LDH活性(P＜0.01),减轻质膜损伤以及细胞形态学变化,调节MAPK信号通路关键蛋白Ras、磷酸化c-Raf(phosphorylated c-Raf,p-c-Raf)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶 1/2(phosphorylated extracellular regulated protein kinase 1/2,p-Erkl/2)、磷酸化丝裂原活化的细胞外信号调节激酶 1/2(phosphorylated mitogen-activated extracellular signal-regulated kinase 1/2,p-MEKl/2)和 p-p38 MAPK 表达(P＜0.05、0.01),调节细胞内 SOD、CAT、GSH-Px 活性以及 GSH、MDA、ROS 水平(P＜0.05、0.01),改善ARPE-19细胞氧化应激反应.结论 MSE可能通过调控ROS介导的MAPK信号通路相关蛋白的表达,对蓝光诱导的ARPE-19细胞氧化应激损伤起保护作用.

艾柱燃烧产物;ARPE-19;蓝光;氧化应激;丝裂原活化蛋白激酶信号通路

陈如一;黄妍;徐文静;赵鑫钰;夏道宗

浙江中医药大学药学院,浙江杭州 310053

中草药

[1]陈如一;黄妍;徐文静;赵鑫钰;夏道宗-.基于MAPK信号通路研究艾柱燃烧产物减轻蓝光诱导ARPE-19细胞损伤的作用机制)[J].中草药,2022(11):3376-3384

艾柱燃烧产物,moxa,+MSE,Erkl,MEKl

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