目的:本研究旨在评价熊竹素(JAR)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞增殖的抑制作用及机制.方法:体外培养人主动脉平滑肌细胞株(HA-SMCs),10-6 mol·L-1的Ang Ⅱ诱导HA-SMCs增殖并使用梯度稀释的JAR进行干预,检测HA-SMCs活性、培养基中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力.使用2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)探针和流式细胞仪检测HA-SMCs中ROS水平.利用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测HA-SMCs中尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NOX)4、NOX2及核因子кB(NF-кB)的表达水平.结果:JAR对Ang Ⅱ诱导的HA-SMCs活性增加具有显著抑制作用(P＜0.01).AngⅡ诱导组HA-SMCs中荧光强度较对照组细胞显著增加(P＜0.05或P＜0.01),说明细胞中ROS水平较对照组显著增加,而JAR干预能够显著地降低Ang Ⅱ诱导的ROS生成(P＜0.05).Ang Ⅱ诱导组HA-SMCs培养基中CAT、SOD及GSH-Px活力较对照组显著降低(P＜0.01),而JAR干预组上述酶活力显著增加(P＜0.05或P＜0.01).RT-PCR检测结果显示,Ang Ⅱ组NOX4和NOX2在HA-SMCs中的表达较对照组显著升高(P＜0.05或P＜0.01),而JAR干预能够显著抑制AngⅡ诱导的NOX4和NOX2在HA-SMCs中的表达(P＜0.05).Western blot 检测结果显示,Ang Ⅱ 诱导 HA-SMCs 48 h 后,NOX4、NOX2 及 p-NF-KB 在 HA-SMCs 中的表达水平显著增加(P＜0.01),而JAR干预能够显著抑制上述蛋白的表达(P＜0.05).结论:黄芪熊竹素通过NOX4/ROS/NF-KB通路抑制AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞增殖.

熊竹素;平滑肌细胞;增殖;氧化应激;尼克酰胺腺嘌吟二核苷酸磷酸氧化酶4/活性氧/核因子кB

张铭杰;刘晶;聂慧娟;刘天龙;肖志彬

内蒙古医科大学附属医院药剂部 呼和浩特010030;内蒙古医科大学附属医院心内科;内蒙古医科大学药学院临床药学教研室

中国药师

[1]张铭杰;刘晶;聂慧娟;刘天龙;肖志彬-.黄芪熊竹素通过NOX4/ROS/NF-KB通路抑制血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖)[J].中国药师,2022(10):1697-1702

黄芪,熊竹素,NOX4,ROS,KB,血管紧张素,血管平滑肌细胞,JAR,Ang,体外培养,人主动脉平滑肌细胞,细胞株,HA,SMCs,梯度稀释,过氧化氢酶,CAT,谷胱甘肽过氧化物酶,GSH,Px,二氯,荧光素,乙酸酯,DCFH,DA,流式细胞仪,实时荧光定量聚合酶链式反应,蛋白质印迹法,blot,尼克酰胺,腺嘌呤,NOX2,核因子,显著抑制作用,荧光强度,明细,酶活力,嘌吟

0.180121