目的 探讨淫羊藿苷元(icaritin,ICT)在肠道内的转运机制,并阐明ICT生物利用度低的主要原因.方法 采用体外细胞模型人结肠癌Caco-2细胞及小肠癌LS-180细胞和人药物转运蛋白细胞系[P-糖蛋白(P-glycolprotein,P-gp,又名MDR1)、乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)和多药耐药相关蛋白 2(multidrug resistance-associated protein 2,MRP2)过表达的狗肾细胞系MDCK-MDR1、MDCK-BCRP、MDCK-MRP2及空白转染的狗肾细胞系MDCK-mock;有机阴离子转运多肽 2B1(organic anion transporting polypeptides 2B1,OATP2B1)过表达的人胚胎肾细胞 HEK293-OATP2B1及空白转染的人胚胎肾细胞HEK293-mock],应用实时定量荧光PCR、LC-MS/MS联用、放射性同位素示踪等技术,共同研究淫羊藿苷元在肠道的跨膜转运机制.结果 Caco-2细胞研究中,ICT在低浓度给药时摄入方向表观渗透系数(Papp)较小,渗透性较弱,存在明显外排,且外排可被BCRP抑制剂明显抑制,不能被P-糖蛋白(P-glycolprotein,P-gp)抑制剂明显抑制,随着给药浓度的增加,外排逐渐减弱,摄入方向Papp逐渐增加,渗透性逐渐增强.通过人药物转运蛋白细胞系研究,ICT可显著抑制BCRP和OATP2B1的转运,对BCRP和OATP2B1转运蛋白的半数抑制浓度(IC50)分别为6.33、31.8μmol/L;同时,ICT是BCRP和OATP2B1的底物.通过LS-180细胞诱导研究表明,ICT不能诱导肠道外排蛋白P-gp、BCRP的表达上调.结论 ICT在肠内通过被动扩散和主动转运2种机制吸收,其中被动扩散能力弱,主动转运包括外排转运蛋白BCRP的外排和摄入转运蛋白OATP2B1摄入共同介导,且对肠道外排转运蛋白无诱导表达功能.BCRP的外排对ICT吸收影响有限,这可能与ICT的给药浓度及BCRP的饱和浓度有关.

淫羊藿苷元;肠道吸收;转运机制;Caco-2细胞;LS-180细胞;P-糖蛋白;乳腺癌耐药蛋白;多药耐药相关蛋白2;有机阴离子转运多肽2B1

慈小燕;孙英辉;武卫党;曾勇;刘昌孝;伊秀林;闫凤英

天津药物研究院释药技术与药代国家重点实验室,天津 300462;中国医学科学院药物代谢新技术创新单元,北京 100730;天津和创生物技术有限公司,天津 300301

中草药

[1]慈小燕;孙英辉;武卫党;曾勇;刘昌孝;伊秀林;闫凤英-.淫羊藿苷元的肠道跨膜转运机制研究)[J].中草药,2022(09):2747-2755

淫羊藿苷元,icaritin,glycolprotein,OATP2B1

跨膜转运,转运机制,ICT,生物利用度,体外细胞,细胞模型,人结肠癌,Caco,小肠癌,LS,药物转运蛋白,细胞系,糖蛋白,gp,又名,MDR1,乳腺癌耐药蛋白,breast,cancer,resistance,BCRP,多药耐药相关蛋白,multidrug,associated,MRP2,过表达,肾细胞,MDCK,转染,mock,阴离子,离子转运,多肽,organic,anion,transporting,polypeptides,人胚胎,HEK293,实时定量,LC,放射性同位素,同位素示踪,摄入,表观渗透系数,Papp,渗透性,给药浓度,半数抑制浓度,IC50,底物,细胞诱导,导研,肠内,被动扩散,主动转运,扩散能力,外排转运蛋白,诱导表达,表达功能,肠道吸收

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