本研究采用情志应激诱导的潜伏Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)复发的"肝郁化火"动物模型,研究清热消炎宁对HSV-1激活复发的作用及机制.实验方案经暨南大学动物实验伦理委员会批准,所有程序均严格按照动物使用和护理的伦理原则进行.实验分为正常组、潜伏组、激活组、清热消炎宁低剂量组(0.658g·kg-1·day-1)、高剂量组(1.316 g·kg-1·day-1)和阳性药阿昔洛韦组(0.206 g·kg-1·day-1).除正常组和潜伏组外,其他组小鼠在给药的第4天开始每天拘束12 h,连续拘束4天,在给药7天结束以后,记录小鼠的体质量变化和眼部炎症复发情况.乙醚麻醉小鼠后,取脑组织进行以下指标的检测:免疫组化实验方法检测HSV-1抗原分布情况;空斑法检测病毒滴度;RT-PCR法检测HSV-1相关病毒基因感染细胞多肽27(ICP27)和糖蛋白B(gB)的表达水平;Western blot法检测HSV-1相关病毒蛋白ICP27和gB的表达、脂质过氧化产物4-羟基壬烯醛(4-HNE)水平和铁死亡相关通路中花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)、铁蛋白转运受体1(TFR1)、二价金属转运蛋白1(DMT1)、谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)和钙非依赖磷脂酶A2β(iPLA2β)蛋白表达水平;丙二醛(MDA)检测试剂盒检测另一脂质过氧化产物MDA的含量.实验结果显示,清热消炎宁能抑制情志应激诱导HSV-1激活复发小鼠体质量比的下降,降低眼部炎症复发率和脑组织HSV-1抗原分布和病毒滴度,显著下调HSV-1病毒基因ICP27和gB、病毒蛋白ICP27和gB的表达水平.此外,清热消炎宁还能明显抑制HSV-1激活复发小鼠脑组织中铁死亡通路正调节相关蛋白DMT1、TFR1和ALOX15的表达,并能减少脂质过氧化物产物4-HNE和MDA的水平.以上实验结果表明,清热消炎宁能抑制情志应激介导的HSV-1激活复发,其作用机制可能与干预铁死亡有关.本研究可为清肝泻火中药防治HSV-1激活复发感染导致的相关疾病的中医药防治提供理论依据.

情志应激;清热消炎宁;九节茶;肝郁化火;Ⅰ型单纯疱疹病毒激活;铁死亡

姜珊;牛杰;欧阳淑桦;江涛;彭红英;罗卓;栗原博;李怡芳;何蓉蓉

暨南大学,广东省疾病易感性及中医药研发工程技术研究中心,广东广州510632;暨南大学药学院中药及天然药物研究所,广东广州510632;暨南大学中医学院,广东广州510632;广州白云山敬修堂药业股份有限公司,广东广州510130

药学学报

[1]姜珊;牛杰;欧阳淑桦;江涛;彭红英;罗卓;栗原博;李怡芳;何蓉蓉-.清热消炎宁抑制潜伏Ⅰ型单纯疱疹病毒激活的作用研究)[J].药学学报,2022(06):1641-1648

清热消炎宁,658g,iPLA2,九节茶

单纯疱疹病毒,病毒激活,情志应激,HSV,肝郁化火,动物模型,实验方案,暨南大学,动物实验伦理,伦理委员会,伦理原则,day,高剂量,阿昔洛韦,天开,拘束,质量变化,眼部,复发情况,乙醚,免疫组化,化实验,实验方法,空斑,病毒滴度,病毒基因,多肽,ICP27,糖蛋白,gB,blot,病毒蛋白,脂质过氧化产物,壬烯,烯醛,HNE,铁死亡,相关通路,花生四烯酸,加氧酶,ALOX15,铁蛋白,TFR1,二价,价金,金属转运蛋白,DMT1,谷胱甘肽过氧化酶,GPX4,磷脂酶,蛋白表达水平,检测试剂盒,小鼠脑组织,中铁,脂质过氧化物,清肝泻火,中药防治,相关疾病,中医药防治

0.256623