目的:探讨维生素C对脂多糖（LPS）所致脓毒症肾损伤的保护作用及机制。方法:采用10 mg/L LPS分别诱导肾小管上皮HK-2细胞8 h和12 h，之后分别加入0.5 mmol/L与1 mmol/L维生素C继续作用，使用细胞增殖与毒性检测试剂（CCK-8）检测细胞生存率，以确定后续的合适实验条件。将细胞分为空白对照组、LPS组和LPS+维生素C组（LPS+VC组）。采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测各组HK-2细胞坏死关键蛋白〔磷酸化混合谱系激酶结构域样蛋白（p-MLKL）、磷酸化受体相互作用蛋白激酶3（p-RIPK3）〕的蛋白表达，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组HK-2细胞炎症因子〔白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）〕水平，比较各组间上述指标的差异。结果:CCK-8检测结果显示，1 mmol/L维生素C能使LPS诱导12 h后的HK-2细胞生存率提高至86%，故选用该条件进行后续实验。LPS诱导HK-2细胞12 h后，p-MLKL和p-RIPK3的蛋白表达均显著高于空白对照组，IL-1β、TNF-α水平也均显著高于空白对照组〔IL-1β（ng/L）：23.2±1.4比12.8±3.9，TNF-α（ng/L）：36.4±3.9比11.6±1.8，均 P<0.05〕，提示细胞坏死与炎症反应同时存在；而与LPS组比较，1 mmol/L维生素C可明显降低p-MLKL和p-RIPK3的蛋白表达，也能明显降低IL-1β与TNF-α水平〔IL-1β（ng/L）：19.8±0.7比23.2±1.4，TNF-α（ng/L）：17.4±5.8比36.4±3.9，均 P<0.05〕。 结论:维生素C可缓解LPS诱导的HK-2细胞损伤，降低坏死关键蛋白与炎症因子的表达。

脓毒症;肾损伤;维生素C;坏死性炎症

徐文筠;毛恩强;陈尔真;卞晓岚;何娟

上海交通大学医学院附属瑞金医院药剂科，上海　200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院急诊科，上海　200025

中华危重病急救医学

[1]徐文筠;毛恩强;陈尔真;卞晓岚;何娟-.维生素C对LPS诱导脓毒症肾损伤的保护作用及其机制研究)[J].中华危重病急救医学,2022(12):1291-1295

LPS+VC

脓毒症,肾损伤,脂多糖,肾小管,HK,别加,毒性检测,CCK,实验条件,空白对照,蛋白质免疫印迹,免疫印迹试验,blotting,细胞坏死,关键蛋白,磷酸化,混合谱系激酶结构域样蛋白,MLKL,受体相互作用蛋白激酶,RIPK3,酶联免疫吸附试验,细胞炎症因子,该条,细胞损伤,坏死性炎症

0.200249