目的:评价低温缺氧复氧时大鼠心肌成纤维细胞(RCF)对H9c2细胞缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响。方法:体外培养的H9c2细胞，采用随机数字表法分为4组( n＝12)：对照组(C组)、低温缺氧复氧组(HHR组)、RCF共培养组(Co组)和RCF共培养+低温缺氧复氧组(Co+HHR组)。C组于37 ℃、5%CO 2+95%空气条件下培养5 h。HHR组于4 ℃、5%CO 2+95%N 2条件下培养1 h，然后于37 ℃、5%CO 2+95%空气条件下培养4 h。Co组和Co+HHR组将0.3×10 5个/孔H9c2细胞接种于Transwell ?小室下层培养皿、0.6×10 5个/孔RCF接种于上层小室。Co组于37 ℃、5%CO 2+ 95%空气条件下培养5 h；Co+HHR组于4 ℃、5%CO 2+95%N 2条件下培养1 h后，于37 ℃、5%CO 2+95%空气条件下培养4 h。采用台盼蓝染色法测定H9c2细胞死亡率，免疫荧光法测定Cx43和细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)的表达水平，Western blot法测定Cx43、磷酸化Cx43、ERK1/2及磷酸化ERK1/2的表达水平。 结果:与C组相比，HHR组H9c2细胞死亡率升高，Cx43表达及磷酸化水平降低，ERK1/2表达及磷酸化水平升高( P<0.05)，Co组H9c2细胞死亡率、Cx43及ERK1/2的表达与磷酸化水平差异无统计学意义( P>0.05)；与Co组相比，Co+HHR组H9c2细胞死亡率升高，Cx43及ERK1/2的表达和磷酸化水平降低( P<0.05)；与HHR组相比，Co+HHR组H9c2细胞死亡率升高，Cx43及ERK1/2的表达和磷酸化水平降低( P<0.05)。 结论:低温缺氧复氧时RCF可降低H9c2细胞Cx43的表达水平和活性，其机制可能与下调ERK1/2的表达、抑制ERK1/2的活性有关。

低温;低氧;成纤维细胞;肌细胞，心脏;连接蛋白43;细胞外信号调节MAP激酶类

佟睿;高鸿;冯玉蓉;易菁;何幼芹;曹莹;吴学艳;唐剑

贵州医科大学麻醉学院，贵阳　550004;贵州医科大学第三附属医院，都匀　558000;贵州省六枝特区人民医院麻醉科，六盘水　553400;贵州医科大学临床医学院，贵阳　550004;贵州中医药大学第二附属医院麻醉科，贵阳　550004;贵州中医药大学第一附属医院麻醉科，贵阳　550004

中华麻醉学杂志

[1]佟睿;高鸿;冯玉蓉;易菁;何幼芹;曹莹;吴学艳;唐剑-.低温缺氧复氧时大鼠心肌成纤维细胞对H9c2细胞Cx43表达的影响)[J].中华麻醉学杂志,2022(01):65-70

Co+HHR,2+95,Transwell

缺氧复氧,心肌成纤维细胞,H9c2,Cx43,价低,RCF,细胞缝隙连接,缝隙连接蛋白,体外培养,共培养,CO ,N ,10 ,小室,培养皿,台盼蓝,蓝染,染色法,细胞死亡,免疫荧光法,细胞外调节蛋白激酶,ERK1,blot,磷酸化,平降,低氧,肌细胞,MAP,酶类

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