目的:观察蛋白酪氨酸磷酸酶相互作用蛋白（protein tyrosine phosphatase interacting protein, PTPIP）51对线粒体-内质网结构偶联（the mitochondria-associated endoplasmic reticulum membranes, MAMs）的影响，探讨其在小鼠神经母细胞瘤（mouse neuro-blastoma N2a, N2a）细胞氧糖剥夺/复糖复氧（oxygen glucose deprivation/reoxygenation, OGD/R）损伤中的作用。方法:将指数生长的N2a细胞株置于37 ℃、5%CO 2、95%空气的细胞培养箱内培养至细胞密度达70%，按照随机数字表法分为4组：对照组（C组）、氧糖剥夺/复糖复氧组（OGD/R组）、干扰小RNA（small interfering RNA, siRNA）-PTPIP51转染组（siRNA组）、siRNA-NC转染组（NC组）。OGD/R模型制备：将N2a细胞高糖培养液换成低糖培养液，置于37 ℃、5%CO 2、95% N 2缺氧环境中培养3 h后重新置于高糖培养液中正常条件下培养。C组继续在正常条件下培养；OGD/R组仅制备OGD/R模型；siRNA组与NC组在OGD/R模型制备前48 h分别转染siRNA-PTPIP51及siRNA-NC，余同OGD/R组。各组于复糖复氧12 h、24 h后收集细胞检测。细胞计数试剂盒（cell counting kit-8, CCK-8）法检测细胞存活率，流式细胞术检测细胞凋亡率，实时荧光定量PCR（real-time fluorescent quantitative PCR, RT-qPCR）检测PTPIP51 mRNA表达水平，Western blot检测PTPIP51蛋白水平，共聚焦显微镜观察线粒体-内质网共定位水平。 结果:与C组比较，其他3组细胞存活率降低（ P<0.05），细胞凋亡率、线粒体-内质网共定位水平、PTPIP51 mRNA及PTPIP51蛋白水平均升高（ P<0.05）；与OGD/R组比较，siRNA组细胞存活率升高( P<0.05），细胞凋亡率、线粒体-内质网共定位水平、PTPIP51 mRNA及PTPIP51蛋白水平均降低（ P<0.05）。 结论:PTPIP51表达上调介导的线粒体-内质网共定位水平提高是N2a细胞OGD/R损伤的机制之一。

线粒体-内质网结构偶联;氧糖剥夺;蛋白酪氨酸磷酸酶相互作用蛋白51;钙超载

于群;赵慧;王炳琪;陈怀龙;张文博;王海鹏;王明山;时飞

潍坊医学院麻醉学院，潍坊　261053;青岛大学附属青岛市市立医院麻醉科，青岛　266071;烟台市烟台山医院麻醉科，烟台　264000

国际麻醉学与复苏杂志

[1]于群;赵慧;王炳琪;陈怀龙;张文博;王海鹏;王明山;时飞-.PTPIP51调节线粒体-内质网结构偶联在N2a细胞氧糖剥夺/复糖复氧损伤中的作用)[J].国际麻醉学与复苏杂志,2022(02):124-128

PTPIP51,PTPIP

节线,内质网,网结,偶联,联在,N2a,氧糖剥夺,复氧,蛋白酪氨酸磷酸酶,相互作用蛋白,protein,tyrosine,phosphatase,interacting,mitochondria,associated,endoplasmic,reticulum,membranes,MAMs,神经母细胞瘤,mouse,neuro,blastoma,glucose,deprivation,reoxygenation,OGD,细胞株,CO ,细胞培养,培养箱,箱内,细胞密度,small,interfering,siRNA,转染,NC,模型制备,高糖,培养液,换成,低糖,N ,缺氧环境,中正,试剂盒,cell,counting,kit,CCK,细胞存活率,流式细胞术,细胞凋亡率,real,fluorescent,quantitative,qPCR,blot,共聚焦显微镜,共定位,钙超载

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