目的 观察桂枝去桂加茯苓白术汤含药血清对TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞上皮—间充质转化(EMT)的影响,并探讨其作用机制.方法 取雄性SD大鼠40只,随机分为低剂量组、中剂量组、高剂量组和空白对照组各10只,其中低剂量组、中剂量组、高剂量组分别给予桂枝去桂加茯苓白术汤5、10、20 g/(kg·d)灌胃,空白对照组给予等体积生理盐水灌胃,连续7 d.腹主动脉采血,取上清.将HK-2细胞分为5组,空白对照组加入空白对照组大鼠血清;TGF-β1组加入5 ng/mL TGF-β1;低浓度含药血清干预组先加入低剂量组大鼠含药血清后,再加入5 ng/mL TGF-β1;中浓度含药血清干预组先加入中剂量组大鼠含药血清后,再加入5 ng/mL TGF-β1;高浓度含药血清干预组先加入高剂量组大鼠含药血清后,再加入5 ng/mL TGF-β1;各组均培养48 h.采用Western blotting法检测各组细胞EMT标志蛋白E-cadherin、α-SMA、Vimintin蛋白表达,MAPK信号通路相关蛋白ERK1/2、p38、JNK及其磷酸化水平,Smad3信号通路中Smad3及p-Smad3蛋白表达.结果 与空白对照组比较,TGF-β1组α-SMA、Vimintin蛋白表达升高,E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05或<0.01);与TGF-β1组比较,低浓度含药血清干预组E-cadherin及α-SMA蛋白表达差异无统计学意义;中浓度及高浓度含药血清干预组α-SMA、Vimintin蛋白水平降低,E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05或<0.01).与空白对照组比较,TGF-β1组ERK1/2、JNK、P38、Smad3蛋白磷酸化水平均升高(P均<0.05);与TGF-β1组比较,低浓度含药血清干预组p38蛋白磷酸化水平降低,中浓度含药血清干预组JNK、p38、Smad3蛋白磷酸化水平降低,高浓度含药血清干预组ERK1/2、JNK、p38、Smad3蛋白磷酸化水平均降低(P<0.05或<0.01).结论 桂枝去桂加茯苓白术汤能够抑制TGF-β1诱导的HK-2细胞EMT过程,其作用机制可能与抑制TGF-β1/Smad3、TGF-β1/MAPK信号通路的激活有关.

桂枝去桂加茯苓白术汤;上皮—间充质转化;转化生长因子β1;Smad3;丝裂原激活的蛋白激酶;肾脏纤维化

孙妍;李清初;谷翠芝;葛汝村;孟凡华;毕慧欣

山东省立第三医院肾内科,济南250031;桂林医学院附属医院肾内科

山东医药

[1]孙妍;李清初;谷翠芝;葛汝村;孟凡华;毕慧欣-.桂枝去桂加茯苓白术汤含药血清对TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞EMT的抑制作用及其机制)[J].山东医药,2022(26):41-44

Vimintin

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