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典型文献
苜蓿花叶病毒RT-PCR和RT-qPCR检测技术体系的
文献摘要:
为准确检测侵染马铃薯核心种苗和种薯的苜蓿花叶病毒(alfalfa mosaic virus,AMV),以AMV马铃薯分离株为阳性材料,建立AMV RNA 1、RNA 2和RNA 3的反转录-聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和基于 EvaGreen 及 TaqMan 探针的反转录实时荧光定量PCR(reverse transcription real-time fluorescent quantitative PCR,RT-qPCR)检测技术,比较3种方法的检测灵敏度,并测定不同马铃薯品种6种组织和桃蚜Myzus persicae、蓟马体内AMV RNA 1、RNA 2和RNA 3的含量.结果表明:建立的TaqMan探针RT-qPCR法对RNA 1和RNA2 的检测灵敏度分别为 1.45×101 copies/μL和 1.46×101 copies/μL,分别是EvaGreen RT-qPCR法和RT-PCR法的10倍;建立的TaqMan探针RT-qPCR法对RNA 3的检测灵敏度与EvaGreen RT-qPCR法相同,为1.15×102 copies/μL,是RT-PCR法的10倍.丽薯15号6种组织中AMVRNA 1、RNA2和RNA3的含量为3.04×106~1.67×108 copies/μL,以叶片中病毒平均含量最高;中薯21号6种组织中AMVRNA 1、RNA 2和RNA 3的含量为2.94×102~4.78×108copies/uL,未发现明显分布规律.蓟马体内 AMV RNA 1、RNA 2 和 RNA 3 的含量分别为 8.64×104~4.76×107、2.13×103~1.50×105和 8.08×103~4.96×105 copies/μL,RNA 1 的含量高于 RNA 2 和 RNA 3.桃蚜体内 AMV RNA 1、RNA 2 和RNA 3 的含量分别为 4.71×103~3.44×104、2.22×102~1.32×105和 5.41×101~8.08×102 copies/μL,RNA3的含量最低.表明RT-PCR法、TaqMan探针RT-qPCR法和EvaGreen RT-qPCR法均可有效扩增马铃薯6种组织和2种昆虫中的AMV.
文献关键词:
苜蓿花叶病毒;TaqMan探针RT-qPCR;EvaGreen RT-qPCR;RT-PCR;马铃薯
作者姓名:
高艳玲;范国权;程胜群;张威;邱彩玲;申宇;聂先舟;白艳菊;吕文河
作者机构:
东北农业大学农学院,哈尔滨150030;黑龙江省农业科学院经济作物研究所,哈尔滨150086;加拿大农业和农业食品部弗雷德里克顿研究发展中心,新不伦瑞克弗雷德里克顿E3B4Z7
文献出处:
引用格式:
[1]高艳玲;范国权;程胜群;张威;邱彩玲;申宇;聂先舟;白艳菊;吕文河-.苜蓿花叶病毒RT-PCR和RT-qPCR检测技术体系的)[J].植物保护学报,2022(02):515-527
A类:
苜蓿花叶病毒,EvaGreen,AMVRNA,108copies
B类:
qPCR,侵染,种苗,种薯,alfalfa,mosaic,virus,分离株,聚合酶链式反应,reverse,transcription,polymerase,chain,reaction,TaqMan,real,fluorescent,quantitative,检测灵敏度,马铃薯品种,桃蚜,Myzus,persicae,蓟马,马体,RNA2,RNA3,uL,昆虫
AB值:
0.201932
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