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表达长效生长激素的CHO细胞培养工艺的优化及放大
文献摘要：
目的 在NewBrunSwick310 14 L生物反应器中培养表达重组人长效生长激素(recombinant human growth hor-mone Fc fusion protein,rhGH-Fc)的CHO细胞,优化工艺参数以提高表达量,并进行NewBrunSwick310 14 L到New-BrunSwick510 40L生物反应器的工艺放大.方法 在原有14 L培养工艺基础上,调节转速、通气速率等参数,并对参数调整时期进行工艺优化.通过对渗透压、乳酸、铵离子、钾离子等代谢过程产物的检测来确保代谢正常,利用HPLC法测定表达量.再根据经验公式算出可线性放大的体积依赖型参数,保持原有培养方案及补料策略不变的情况下,结合不同放大经验方法确定操作窗口,从而进行工艺放大.结果 14 L生物反应器优化工艺乳酸累积量低于20 mmol/L、最终铵离子累积量为8 mmol/L、钾离子累积量为14 mmol/L、渗透压为425 osmol/kg,降温后比耗糖速率为0.12 g/(109 cells·d),表达量为0.9 g/L.经检测,放大至40 L生物反应器,整个培养过程耗糖曲线及代谢产物均与14 L生物反应器中一致,表达量为1.0 g/L.结论 成功优化了 rhGH-Fc工程细胞大规模培养的工艺,并进行了规模放大,为rhGH-Fc的后续开发奠定了基础.
文献关键词：
生长激素;Fc融合蛋白;CHO细胞;生物反应器;工艺放大
中图分类号：
作者姓名：
梁久佳;刘玉林;刘涵;俞露;张凯宁;刘景会;李利
作者机构：
长春生物制品研究所细胞因子室,吉林长春130012;长春理工大学生命科学学院,吉林长春130022
文献出处：
引用格式：
[1]梁久佳;刘玉林;刘涵;俞露;张凯宁;刘景会;李利-.表达长效生长激素的CHO细胞培养工艺的优化及放大)[J].中国生物制品学杂志,2022(02):209-214,227
A类：
长效生长激素,NewBrunSwick310,BrunSwick510,osmol
B类：
CHO,细胞培养,生物反应器,组人,recombinant,human,growth,hor,mone,Fc,fusion,protein,rhGH,优化工艺,40L,工艺放大,通气速率,参数调整,渗透压,铵离子,钾离子,代谢过程,HPLC,经验公式,线性放大,依赖型,培养方案,补料,经验方法,cells,经检测,培养过程,代谢产物,工程细胞,规模放大,融合蛋白
AB值：
0.338505
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